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2324646315

新虫 (初入文坛)

[求助] 新手一只,用同源重组酶或T4连接酶连接有什么区别? 已有1人参与

新手一只,用同源重组酶或T4连接酶连接有什么区别?我有两个目的片段需要放在pet-28a的载体上,一个片段用了载体自带的一个启动子,另一个片段p了一个启动子用同源重组酶连接连不上去是什么原因呢
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hjh324

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

同源重组是需要同源臂,载体酶切,目的片段不需要,而且50℃需要30 min即可,T4 ligase是载体和目的片段都需要酶切,16℃过夜连接,需要的时间长而已。
2楼2022-07-08 14:22:03
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