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心绪0603铜虫 (正式写手)
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[求助]
求助！冷冻电镜观察蛋白质的制样问题，谢谢！
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各位大佬好， 本人想利用冷冻电镜观察蛋白质结构，并不一定需要解析出明确的蛋白质结构。但在制样过程中就遇到了问题，问题如下，望大佬解答，感激不尽！ 膜蛋白利用去污剂从生物膜中提取出，而后利用蔗糖梯度密度离心法提纯。这样提纯的蛋白质溶液中含有高浓度的蔗糖（大约20-40%）。不知道这样高浓度的蔗糖会不会影响蛋白质的形态观察，如果会影响的话，要怎样除去或降低蔗糖浓度呢？我看许多文章中都是利用蔗糖法提纯的，但是并没有提到这些细节。 参考文献如下：10.1038/s41586-020-2020-7、10.1038/nature19359 感激不尽！ |
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