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心绪0603铜虫 (正式写手)
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[求助]
求助!冷冻电镜观察蛋白质的制样问题,谢谢!
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各位大佬好, 本人想利用冷冻电镜观察蛋白质结构,并不一定需要解析出明确的蛋白质结构。但在制样过程中就遇到了问题,问题如下,望大佬解答,感激不尽! 膜蛋白利用去污剂从生物膜中提取出,而后利用蔗糖梯度密度离心法提纯。这样提纯的蛋白质溶液中含有高浓度的蔗糖(大约20-40%)。不知道这样高浓度的蔗糖会不会影响蛋白质的形态观察,如果会影响的话,要怎样除去或降低蔗糖浓度呢?我看许多文章中都是利用蔗糖法提纯的,但是并没有提到这些细节。 参考文献如下:10.1038/s41586-020-2020-7、10.1038/nature19359 感激不尽! |
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