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铜虫 (初入文坛)

[交流] 小鼠常用的注射给药方法

在生物医学研究中,为了观察药物疗效、阐明疾病发生机制,研究动物机体功能及代谢等,通常都需要将药物注入动物体内。
实验动物常见的给药方式有:注射给药,灌胃给药,口服,鼻滴给药等多种。一般需要根据实验目的、动物种类及药物剂型、剂量等,选择合适的给药方式。
今天,重点向大家介绍注射给药,目前主要的注射给药方式有皮下注射、皮内注射、肌肉注射、(尾)静脉注射和腹腔注射几种,下面详细介绍:
01 皮下注射(Subcutaneous Injections,SC)
皮下注射给药:是将药液注入皮下结缔组织,经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环的方法。在生物医学研究中,皮下注射也是一种常见的给药方式。
该技术通常用于皮肤较薄、皮下组织疏松且血管较少的部位,如颈背部、腋下或大腿内侧的皮肤。(建议常用部位是鼠两耳提起后可出现一皮肤凹陷处,在此给药可确保药物给在皮下。)
凡是易溶解、无刺激性的药物以及菌苗、疫苗、细胞等,都可以进行皮下注射。
具体操作步骤:首先抓取固定小鼠,剃去注射部位毛发并用酒精消毒,用左手拇指与食指捏起小鼠背部皮肤,右手手持注射器,针头斜面朝上与皮肤呈30-45°角刺入帐篷状皮肤,刺入后针头轻轻左右摆动(易摆动说明已刺入皮下),再轻轻抽吸,如无回血,可缓慢地将药物注入皮下(推药过程中能明显观察到注射部位鼓起一小包,小包一定时间可消失)。注射完拔出针头后用无菌棉签压住进针部位片刻以免药物外漏。
注射剂量:大鼠一般小于1ml/100g,小鼠一般为0.1~0.3ml/10g。总药量:小鼠不超过0.5ml,大鼠不超过1ml。
注意事项:
1.正确抓取动物,动物必须受到足够宽松的抓握,这样皮肤才能活动起来。2.如果动物要接受多次皮下注射,可交替注射部位。
02 皮内注射(Intradermal Injections,ID )
皮内注射给药:是将药液注入皮肤的表皮和真皮之间,用于观察皮肤血管的通透性变化或皮内反应,接种、过敏实验等。皮内注射吸收较慢。皮内注射一般选用背部脊柱两侧的皮肤。
具体操作步骤:固定小鼠后,将注射部位毛发剃去,局部常规消毒,左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧,在两指之间进行针头穿刺,针头斜面朝上与皮肤呈大约30°角刺入,同时针头稍微上挑起并稍刺入,将药液注入皮内。注射后皮肤出现小丘疹状隆起并且比周围的皮肤白,且皮肤上的毛孔极为明显。如果注射时感觉比较费力,说明注射正确;如果感觉比较容易,说明已注入皮下,要拔出针头重新注射。
注射剂量:大鼠一般小于0.1ml/次,小鼠一般小于0.05ml/次。
注意事项:不要回抽注射器。
03 肌肉注射(intramuscular injection,IM)
肌肉注射一般用于有特定给药方式要求的药物,或不溶、难溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时可选择肌肉注射。注射部位一般选择肌肉丰富、血管较少的臀部。大小鼠后肢处肌肉较少,故一般不进行肌肉注射。
具体操作步骤:肌肉注射一般在动物麻醉后进行,或者由两个人操作,一人固定动物,另一人执行注射。一般注射部位为大腿内侧或外侧肌肉。酒精消毒注射部位后,左手抓住后肢,右手持针插入肌肉,试着回抽针筒,如有血液或液体回流,表示不适当,需重新插入。确定针头插入肌肉后,慢慢将药剂推入,推入的速度应避免太快,以免组织损伤。
注射剂量:大鼠单次注射量一般不要超过0.3ml。小鼠单次注射量一般不要超过0.1ml。
注意事项:1、正确抓取动物,确保动物的一个后腿是自由的,稳定地注射。2、针应该垂直于动物的皮肤插入。3、不要注射到后面的肌肉群,因为可能会损伤坐骨神经。4、如果小鼠要接受多次肌肉注射,要双腿交替注射。
皮下注射和肌肉注射,药物主要是经皮下和肌肉中的毛细血管吸收,吸收没有静脉注射完全,但皮下注射和肌肉注射也成功的避开了胃肠道和肝脏首过代谢。
04  尾静脉注射(Intravenous Injections,IV)
静脉注射:一种用注射器将少量或单一种类药品注射到静脉,使药物直接进入血液循环的一种方式。静脉注射是效率最高的给药方式,不需要溶剂的吸收,不存在收过代谢,生物利用率最高。可以通过一次性注射或滴注的方式注射入血管内
大小鼠的尾静脉共有3条,其中尾部左右两侧各有一条,背侧有一条。因为左右两侧静脉角质层较薄且易固定,所以常为注射所用。
具体操作步骤:操作时将小鼠用专门的保定器保定,使其尾部充分暴露,尾部用45-50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张,并使表皮角质软化,用左手拇指、食指和无名指捏住并从下面托起尾巴,用无名指和小指夹住尾巴的末梢,右手持注射器使针头与静脉平行(小于30°),距鼠尾尖1/4处(约距尾尖2-3厘米)处进针,此处皮薄易于刺入,先缓注少量药液,如无阻力,无白色皮丘出现,表示针头已进入静脉,可正式注入药物。
若推药无阻力且血管整条会立即由红变白,推完药则血管又恢复红色,用干棉球按压止血则尾静脉注射完成。如需反复注射,应从尾部末端开始,逐渐向尾根方向移动。
注射剂量:小鼠单次注射量一般为0.1~0.2ml/10g。大鼠单次注射量一般为0.3~0.5ml/100g。
注意事项:
(1)如阻力较大,或注射时有隆起,则说明注射到了皮下。此时应迅速抽出注射器,轻轻在原注射位点稍上的位置再次注射。
(2)静脉血管充盈是保证注射成功率的重要因素。一般使用酒精在小鼠尾静脉部位来回擦拭,由于小鼠尾静脉很浅静脉很浅,插入深度不宜超过斜面太多。
(3)注射开始尽可能靠近尾尖(远心端),如果第一次注射失败,这样还有未受损静脉用来再次注射。
05 腹腔注射(Intraperitoneal Injections,IP)
腹腔注射:将药物注入动物胃肠道浆膜以外、腹膜以内的注射方式。腹腔注射作为常用给药方式的一种,方便易行,吸收快速,一般用于小鼠麻醉、药物诱导等实验,一般用于不适宜或经胃肠道吸收效率较低的给药,并且还能对幼鼠进行诱导。
经腹腔给药,药物吸收速度较静脉注射慢,但是这种给药方式可以注射的药物体积要大于静脉注射,对于个体较小的实验动物给药具有重要意义。
具体操作步骤:腹腔注射时右手持注射器,左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴,另外三个手指抓住小鼠的颈部,翻转小鼠使小鼠的头部向下,腹部向上。这样由于重力作用,腹腔中的器官就会自然倒向胸部,防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。
右手将注射针头于左下腹部刺入皮下,以45度角穿过腹肌(进针不能太深,感到明显的穿透感即可,以防刺入脏器,进针后注意回抽,抽回较吃力且仅空气被回吸则说明进针成功),固定针头,缓缓注入药液。进针的动作要轻柔,防止刺伤腹部器官。
注射完后不能立马抽出针头,要将针头在腹腔内多停留一段时间,堵住伤口阻止药物外流,让药物随着脏器蠕动被转移。注射剂量:大鼠单次注射量一般为1.0~2.0ml/100g。小鼠单次注射量一般为0.1~0.2ml/10g。
注意事项:
1、针头刺破腹肌后会有落空感,此时针头已进入腹腔,应停止进针以免针头刺入过深损伤内脏。
2、为避免伤及内脏,应使动物处于头低位,使内脏移向上腹。
3、对于体重较小的小鼠,腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离,最好是从腹部一侧进针,穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔,注射完药物后,缓缓拔出针头,并轻微旋转针头,防止漏液。
小鼠尾静脉注射对初学者来说,可能有一定难度,但注射是否成功容易判断,不会对实验结果造成影响。而腹腔注射虽然看似简单,但如果操作不当,很容易造成注射失败,并不被发现,直接影响到实验结果。
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