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汕头大学海洋科学接受调剂
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xihanlianz

银虫 (正式写手)

[交流] PCR条件优化

我提取的是植物基因组DNA,用ISSR引物做PCR扩增,条件都是我自己在摸索,没有扩增出条带,想做一下优化,但是鉴于摸索的条件很多,不知道如何设计,请大家多多赐教   

请问一下2楼,一定浓度的混合液(20ul)里各个成分的浓度应该如何设置呢?

[ Last edited by xihanlianz on 2009-9-10 at 13:50 ]
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gastrodia

金虫 (正式写手)

如果没有确定的策略,建议使用TOUCHDOWN pcr进行扩增
2楼2009-09-09 21:39:37
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anik

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
退火温度你可以用TOUCHDOWN-PCR。其他的条件你可以这样做:
混合一定浓度的混合液(20ul),然后吸取一定比例到下一个PCR管,加水到20,然后同样的方法做个梯度即可。。。。
3楼2009-09-10 08:42:55
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xihanlianz

银虫 (正式写手)

请问一下2楼,一定浓度的混合液(20ul)里各个成分的浓度应该如何设置呢?
4楼2009-09-10 09:50:15
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