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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达过程中菌液的保存
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【悬赏金币】回答本帖问题，作者yzukxx将赠送您 30 个金币

yzukxx

新虫 (初入文坛)

[求助] 原核表达过程中菌液的保存 已有3人参与

原核表达过程中大肠杆菌需要低温诱导24h，诱导完成后来不及超声破碎，纯化蛋白。诱导结束的菌液可以用pbs缓冲液重悬，-80度保存一晚吗？会不会对蛋白活性有较大影响？

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2022-06-07 00:09:36
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这样操作没有问题，或者更简单将摇瓶放在4°C冰箱过夜，第二天离心破菌亦可。
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2022-06-07 14:22:15
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爆炒小木虫

新虫 (小有名气)
不影响酶活

发自小木虫Android客户端
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3楼2022-06-07 14:27:35
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小页xiaoye

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不会影响酶活，我放过一周
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4楼2022-07-26 11:44:46
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SuYuo

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

菌液不应该直接冻存在-80吧？
我说一下我的保存条件：
诱导表达完以后菌液8000g 5min 4℃离心，弃上清，加1/4体积的PBS重悬后再8000g 5min 4℃，标记后保存到-80.
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12
5楼2022-08-19 16:02:31
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SuYuo

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by SuYuo at 2022-08-19 16:02:31
菌液不应该直接冻存在-80吧？
我说一下我的保存条件：
诱导表达完以后菌液8000g 5min 4℃离心，弃上清，加1/4体积的PBS重悬后再8000g 5min 4℃，标记后保存到-80.

PBS离心后也弃上清，菌体沉淀保存在-80
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12
6楼2022-08-19 16:11:08
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