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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 求问一张膜上只能敷出一种蛋白是为什么
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糖醋鱼泡泡

新虫 (初入文坛)

[求助] 求问一张膜上只能敷出一种蛋白是为什么 已有2人参与

如上，众所周知咱们一般一张膜上要敷内参+目的两种蛋白，我之前经常敷不出内参GAPDH；之前也有过能敷出GAPDH但敷不出目的蛋白（αSMA）；这次在同一张膜上敷Bax+Bcl-2+β-actin，发现只有Bcl-2敷不出来。
但按理说这些孵不出来的蛋白表达量都不低才对。而且我上样量不算低，一般30μg（我师姐15μg就能孵出来）。
并且不是抗体的问题，因为我们的抗体很多都是回收反复用的，我和师姐用的同一管，并且我用完（没敷出来）后师姐用了也能敷出来。

真的不知道怎么办了，实验室师兄师姐们都没见过这种状况而且如果蛋白样出问题不是应该都敷不出来吗为什么只是敷不出来一种呀

@gyesang 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2022-06-06 15:34:57
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pangyaoaaa

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同学 你解决了么 我现在也是一张膜上只有bcl跑不出来，甚至觉得切胶位置都不对
赞一下 回复此楼
3楼2022-06-08 19:47:28
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先检测条带弱的，再检测条带强的
赞一下(1人) 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2022-06-07 10:56:30
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