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泰阳的情话

新虫 (初入文坛)

[求助] 纯化蛋白酶活性测定 已有2人参与

想问下各位大佬,我用32a的载体纯化出来可溶性的重组多酚氧化酶蛋白,脱盐后放负80两天,然后测不到酶活性为什么呢

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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
脱盐后是否测试了活性?脱盐前有活性吗?
蛋白有颜色吗? 放入冰箱前后是否颜色变化?
蛋白是否加入DTT保护,是否有甘油?
行至水穷处,坐看云起时
2楼2022-05-27 19:09:34
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xudech

木虫 (正式写手)

xiaochong

这个酶结合铜离子的,脱盐会去除铜,测定酶活时加铜离子试试,一个亚基结合2个铜离子,直接加10倍浓度试试
3楼2022-05-31 15:13:41
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MOON_MOON_

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你纯化后的多酚氧化酶是什么颜色呀,会不会是蛋白浓度不够呢,可以浓缩一下看看
4楼2022-07-10 10:45:34
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MOON_MOON_

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by MOON_MOON_ at 2022-07-10 10:45:34
你纯化后的多酚氧化酶是什么颜色呀,会不会是蛋白浓度不够呢,可以浓缩一下看看

楼主方便加个QQ联系吗,我也是做多酚氧化酶的,想和楼主请教交流一下
5楼2022-07-10 10:48:25
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