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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » 纯化蛋白酶活性测定
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泰阳的情话

新虫 (初入文坛)

[求助] 纯化蛋白酶活性测定 已有2人参与

想问下各位大佬，我用32a的载体纯化出来可溶性的重组多酚氧化酶蛋白，脱盐后放负80两天，然后测不到酶活性为什么呢

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1楼 2022-05-27 18:04:06
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
脱盐后是否测试了活性？脱盐前有活性吗？
蛋白有颜色吗？ 放入冰箱前后是否颜色变化？
蛋白是否加入DTT保护，是否有甘油？
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2022-05-27 19:09:34
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xudech

木虫 (正式写手)

xiaochong
这个酶结合铜离子的，脱盐会去除铜，测定酶活时加铜离子试试，一个亚基结合2个铜离子，直接加10倍浓度试试
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3楼2022-05-31 15:13:41
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MOON_MOON_

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你纯化后的多酚氧化酶是什么颜色呀，会不会是蛋白浓度不够呢，可以浓缩一下看看
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4楼2022-07-10 10:45:34
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MOON_MOON_

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by MOON_MOON_ at 2022-07-10 10:45:34
你纯化后的多酚氧化酶是什么颜色呀，会不会是蛋白浓度不够呢，可以浓缩一下看看

楼主方便加个QQ联系吗，我也是做多酚氧化酶的，想和楼主请教交流一下
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5楼2022-07-10 10:48:25
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