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xihanlianz

银虫 (正式写手)

[交流] 电泳电压问题

请教一下大家,跑电泳的时候,跑出的条带的清晰度跟电压的关系大吗?我前天用90V跑的电泳,marker条带挺清晰的。今天用了75V跑,marker条带比较模糊,因为觉得电泳缓冲液少了,我又倒了一点进去,所以不知道是因为电压的原因还是电泳缓冲液的原因。

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-9 at 09:22 ]
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right304

木虫 (正式写手)

电压因素影响更大些
2楼2009-09-08 18:41:44
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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)


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电压越小跑的越慢,条带分的越清晰啊,有时候电泳液长时间不换容易使DNA降解。
砖石王老三!!!
3楼2009-09-08 18:54:36
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wdgsmv58

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
两天的样品是同一个P产物吗?一般情况下电压和比较正常的缓冲液对条带的清晰度没有关键性的影响,还是分析一下其他原因吧
海纳百川,有容乃大!壁立千仞,无欲则刚!
4楼2009-09-08 19:31:41
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yxhan7113

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
电泳液用久了导电性降低,容易导致条带模糊
新配置的电泳液,低电压,条带清楚
5楼2009-09-08 19:32:51
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
恒压或恒流,两个跑出来有区别。
据说恒流要好些。
VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
6楼2009-09-08 19:37:00
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changes

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是同一批次的产物吗?看看marker怎么样吧?marker两次都清楚的话,可能就是缓冲液的问题了。
另外,电泳时凝胶上所加电压一般不超过5V/cm(正负电极之间的距离),电泳时间一般为3O~60 min。
电压增高,电泳时间缩短,核酸条带相对不够清晰;相反,电压降低,电泳时间较长,核酸条带整齐清晰。
7楼2009-09-08 19:49:56
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daisy8373

金虫 (正式写手)

可能是你的核酸染料太少了,电压只是影响你条带跑的距离。
生命中总有那么一段时光,充满不安,可是除了勇敢面对,我们别无选择。
8楼2009-09-08 20:26:11
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anik

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我用过150V的电压跑过,条带很好。你的缓冲液较好的话,电压大些是没有问题的。
我平时都是用120V跑的,时间较紧或者只是看看结果如何我就用大的电压跑,基本上没出过什么不好的结果。
9楼2009-09-08 20:29:56
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雨雪霏霏9992

应该是电压低了以后,跑得太慢,发生扩散了
10楼2009-09-09 15:56:43
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