应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求教
51/1返回列表
查看: 461  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

anik

银虫 (正式写手)

[交流] 求教

有谁做过去磷酸化？
质粒单酶切后是回收之后再做去磷酸化，还是直接加CIAP进行去磷酸化？
磷酸化反应完后是否需要回收再做连接？
谢谢。。。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-09-08 18:23:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)
没人回答么？
回复此楼
2楼2009-09-08 20:30:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jack6335

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
sutao1979(金币+2,VIP+0):谢谢参与 9-8 21:37
酶切后磷酸化，然后加蛋白酶K、EDTA、SDS酶解CIP，最后再纯化。
赞一下(11人) 回复此楼
砖石王老三！！！
3楼2009-09-08 20:46:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jack6335 at 2009-9-8 20:46:
酶切后磷酸化，然后加蛋白酶K、EDTA、SDS酶解CIP，最后再纯化。

酶切后是回收之后再磷酸化，还是直接磷酸化？
赞一下 回复此楼
4楼2009-09-09 11:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xmchen1015

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
350784478(金币+2,VIP+0):谢谢回答 9-9 15:39
两种都可以，如果直接磷酸化，可在酶切反应的最后30分钟加磷酸酶，但一定保证磷酸酶在酶化反应buffer中有活性。
也可在纯化后加磷酸酶，反应完后可以直接高温失活，不用再纯化就可以做连接。
赞一下(11人) 回复此楼
5楼2009-09-09 12:41:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 anik 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭