应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 特发性血小板减少性紫癜标准操作
71/1返回列表
查看: 867  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

甜荔枝啊

新虫 (小有名气)
已领完
特发性血小板减少性紫癜标准操作
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫，下载小木虫客户端

模型简介：原发免疫性血小板减少症（ITP），以往称特发性血小板减少性紫癜，是一种获得性自身免疫性疾病。是临床所见血小板计数减少引起最常见出血性疾病。通过对患者血小板相关抗体的研究，目前公认绝大多数ITP是由于免疫介导的自身抗体致敏的血小板被单核巨噬细胞系统过度破坏所致。也有新的观点认为是免疫介导损伤巨核细胞或抑制巨核细胞释放血小板，造成患者血小板生成不足。临床表现血小板计数不同程度的减少、伴或不伴皮肤黏膜出血症状。

1.实验动物：SPF级Balb/C小鼠，雄性，；SPF级豚鼠，雄性；

2.实验材料：1%草酸铵溶液，完全弗氏佐剂，不完全弗氏佐剂，生理盐水，1ml注射器，胰岛素注射器，抗凝管等。

3.规程

3.1分离小鼠血小板：

3.1.1小鼠麻醉后心脏采血，共取2ml，置于抗凝离心管中，静置30min后离心；

3.1.2 800rpm离心，上清液即为富含血小板的血浆；

3.1.3吸出上清液置于干净试管中，3500rpm离心，弃去上清液,管底沉淀物为血小板；

3.1.4向试管中滴加1％草酸铵溶液，以玻璃棒轻轻搅拌，再加入质量浓度为1％草酸铵溶液，静置5min，使红细胞溶解；

3.1.5 3500rpm离心,弃去上清，加入血小板洗涤液（生理盐水）并反复吹打，使成为血小板混悬液；

3.1.6 3300rpm离心?，弃去上清，加入少量血小板洗涤液（1ml生理盐水）并反复吹打使之成为混悬液。

3.2抗体血清免疫豚鼠：

3.2.1取制备好的血小板与等量完全弗氏佐剂混合，乳化油包水状，于0周注射豚鼠足掌，背，皮下至少4点，每个点100ul；

3.2.2血小板于等量不完全弗氏佐剂混合，乳化油包水状，于1，2，4周注射豚鼠足掌，背，皮下至少4点，每个点100ul；

3.2.3第5周从豚鼠心脏取血，3000r/min 离心10min后取上清，即为豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)；

3.2.4置56度水浴30min补体灭活，生理盐水1:1稀释后，-20度冰箱储存备用。

3.3小鼠紫癜建模：

于0，2，4，6，8，10d按照100ul/20g体重腹腔注射1:4稀释（比例可根据血清效价进行调整）的豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)。

3.4检测

3.4.1表观及行为学观察：自第2次注射APS后，各组造模后小鼠出现明显皮下紫癜，以注射部位、四肢、尾部为重。第4d开始逐渐出现精神萎靡、眯眼、扎堆、反应迟钝、行动迟缓等症状。

3.4.1组织病理学：第11D，小鼠麻醉后取血，全自动血细胞计数分析仪检测外周血象；流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群；剥离胸骨，取胸骨骨髓涂片，瑞氏染色，观察巨核细胞数量及发育情况。

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2022-05-11 11:39:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

L-li

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您好，请问那个关于那个特发性血小板减少性紫癜模型造模，能请教您几个问题吗？
1、是关于取小鼠的血2ml,请问是取几只小鼠的血？如果取两只以上小鼠的血，是可以混合在一起吗？
2、关于分离出来的血小板，需要用生理盐水稀释成混悬液，我看有的文献上面，是要稀释成1×10^6/ml个血小板，您发布的是加1ml生理盐水，请问这个血小板悬液是可以不需要计数吗?
赞一下 回复此楼
7楼2022-05-14 18:30:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
tzynew2楼
2022-05-11 11:40   回复  
甜荔枝啊(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
科研梦想家3楼
2022-05-11 11:42   回复  
甜荔枝啊(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
秋土豆香4楼
2022-05-11 11:44   回复  
甜荔枝啊(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
gordon3995楼
2022-05-11 12:12   回复  
甜荔枝啊(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
柏拉图之恋6楼
2022-05-11 13:06   回复  
甜荔枝啊(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 甜荔枝啊 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 9/450 2026-08-21 15:38 by dcqxinyang
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 18/900 2026-08-21 13:46 by 医学老男孩
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 什么时候开奖？ +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 18/900 2026-08-21 11:53 by wuchongjun
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭