液氮损伤法造兔颈动脉狭窄模型标准操作 - 生物科学 - 细胞科学

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模型简介：颈动脉狭窄是导致缺血性脑血管疾病的重要原因，粥样硬化以及血管内皮损伤引起血管内皮细胞的异常增殖是颈动脉狭窄的病理基础，改善血管内皮功能及结构是预防颈动狭窄的有效手段。

1.?实验动物：新西兰兔，雌雄不限。

2.?实验材料：缝合线，角针和圆针，自制拉线弯钩，生理盐水，肝素钠注射液，24G留置针，中号和小号手术剪，显微镊，弯镊，持针器，一次性表面皿，棉签，纱布，络合碘消毒液。

3.?操作规程

3.1 实验动物分组：将实验新西兰兔随机分为2组，正常对照组，模型组。

3.2模型建立：动物全部给予高脂饲养（高脂饲料3（92% 普通饲料＋ 6% 猪油＋ 1% 胆固醇＋ 1% 白糖）于手术前 12h 禁食不禁水。麻醉成功后,背位固定,颈部备皮后常规消毒，铺无菌巾，无菌条件下作颈正中切口,长约 6cm。依次切开皮肤、浅筋膜、颈筋膜浅层和气管前筋膜，分离右颈总动脉,长约 2.5cm,两端以血管夹阻断血流。24G 留置针针头尽可能平行于血管纵轴方向穿刺右颈总动脉,生理盐水反复冲洗，置换出管腔内的血液，然后抽空血管腔,换另一支 2.5 ml 无菌注射器抽取液氮约 0.5ml,快速注入右颈总动脉(立即气化为超低温氮气),反复 3 次,历时 2 分钟就可以造成内皮冷冻伤,然后管腔内充满常温生理盐水,先放开远端阻血夹恢复血流，再松开近端，重新建立血液循环。针孔创面敷薄层止血棉，缝合血管，湿润棉签轻轻压迫穿刺点 3~5 分钟止血,观察血流恢复情况,逐层缝合皮肤切口,常规使用抗生素预防感染。

3.3观察和取样：于造模即刻取1只兔子耳缘静脉注射0.5%的伊文思蓝(2 ml/kg)。2小时后处死，分别取两侧颈动脉做elisan检测。

造模后2周，分别对兔子进行超声观察。

发自小木虫Android客户端

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