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小小小叶叶

新虫 (初入文坛)

[求助] 可变剪切RT-PCR检测的技术问题

各位虫友:
我有个基因存在不止一种类型可变剪切情况,当共同点是基因中间片段缺失,我想设计两端保守位的引物,采用RT-PCR的方法检测不同组织间的分布规律,如果都存在的话会同时扩增出几条大小不等的目的条带,RT-PCR结果则完全不是那么回事,所有组织只能扩增出一条最小的可变剪切体,或者一条带没有,其他的,尤其是未发生可变剪切的原始基因都扩增不出来,请各位虫友帮忙分析下原因和解决办法(PCR条件优化很多次了,不见任何改观),谢谢各位!

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