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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » bl21de3表达pet28a16摄氏度还是在沉淀里偏多
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新虫 (初入文坛)

[求助] bl21de3表达pet28a16摄氏度还是在沉淀里偏多 已有1人参与

依次:M 10h 15h 20h 25h 35h的上、清

16摄氏度 rpm90 iptg0.1mM

已经是低温 低iptg 低转速了 还是基本表达在沉淀里 我要的是可溶性表达

有大佬给点建议吗 感谢！ 困扰太久了 谢谢各位
链接: https://pan.baidu.com/s/1Qq1iw2Prl5CoorOKKTOUKA 提取码: kjw6
不会传图片只能用BD网盘传
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1楼 2022-04-29 22:07:27
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
试试融合蛋白表达吧

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2楼2022-04-30 19:57:20
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ybzberlin

新虫 (初入文坛)
试试加一些tag  比如sumo

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3楼2022-05-02 12:25:48
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OR293

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

沉淀里多应该是形成包涵体了，这跟你的蛋白有关，或者可以试试9℃诱导表达，实在不行就换pCold载体表达吧，pCold载体上会自带一个促溶蛋白，完事儿把促溶蛋白切掉就行
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4楼2022-08-22 20:59:19
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skk910416

铜虫 (小有名气)
前面加可溶性标签蛋白或者与分子伴侣一起表达试试

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kai
5楼2022-08-27 21:15:30
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