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汕头大学海洋科学接受调剂
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nancy20052008

木虫 (正式写手)

[交流] 4000-5000bp的大片段克隆表达用什么质粒好?

我现在用的质粒是PQE30,感受态细胞是M15,现在做转化,不知什么原因没有转化进去,是没有连接上吗?
用什么质粒和感受态细胞,成功的几率更大呢?
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主

★ ★
nancy20052008(金币+2,VIP+0): 1-22 15:04
转化效率最高的宿主菌应该是DH5A
质粒双螺旋,碱基数越小越容易转吧  
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
2楼2009-09-07 23:36:02
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aga0110125

银虫 (小有名气)


nancy20052008(金币+1,VIP+0): 1-22 15:04
HD5a一般用作克隆,不太适合表达
3楼2009-09-08 08:45:32
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恒星年

银虫 (正式写手)

★ ★
nancy20052008(金币+2,VIP+0): 1-22 15:04
转化大片段可以用 XL10 菌株
4楼2009-09-08 09:10:03
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nancy20052008

木虫 (正式写手)

DH5α主要是用于保存质粒的,很少用于表达。即使是表达也是小片段。
我们室表达质粒用的是PET32a,他们都做的很好。
所以DH5α不合适。
5楼2009-09-08 09:11:42
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