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籽諾season

新虫 (正式写手)

[求助] sds-page没有条带！！！！ 已有1人参与

求助 在做从发酵液上清分离纯化蛋白质 已经进行了硫酸铵沉淀透析 DEAE纤维素纯化 但是进行SDS-PAGE后没有条带，marker条带正常，但是其他的都没有，实在不知道什么原因，拜托大家解答一下
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1楼 2022-04-19 19:08:43
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花輪君

木虫 (著名写手)
浓度不够吗？

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2楼2022-04-19 19:17:11
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籽諾season

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 花輪君 at 2022-04-19 19:17:11
浓度不够吗？

我还没有测浓度 但是离子交换层析有峰

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3楼2022-04-20 08:21:34
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absinbio

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

从题主的问题来看，应该是已经考染过page胶了，如果默认纯化有效的话，可以提高蛋白上样量，同时也可以用BCA蛋白定量来看下纯化液中的蛋白含量。

爱必信生物可以提供高质量BCA定量试剂盒:https://www.absin.cn/bca-protein-assay-kit/abs9232.html
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4楼2022-04-25 17:05:08
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籽諾season

新虫 (正式写手)
自己找到原因了 浓度不够 增大了上样量 增大了浓度

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5楼2022-05-27 21:37:41
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岸上手牵手

新虫 (小有名气)
您好，楼主，我最近也在做菌体代谢产物抑菌物质的的分离，看文献硫酸铵沉淀蛋白后，进行层析分离，但自己没做过层析，实验室师兄师姐也没做过，（实验室还没有器材，都需要购买,老师让我自己买，可我自己还不太懂，好多地方不理解)，实验停在了硫酸铵沉淀透析后。想麻烦问问楼主能否方便指导一下。QQ2508900653

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6楼2022-09-02 10:10:28
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