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籽諾season

新虫 (正式写手)

[求助] sds-page没有条带!!!! 已有1人参与

求助 在做从发酵液上清分离纯化蛋白质 已经进行了硫酸铵沉淀透析 DEAE纤维素纯化 但是进行SDS-PAGE后没有条带,marker条带正常,但是其他的都没有,实在不知道什么原因,拜托大家解答一下
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花輪君

木虫 (著名写手)

2楼2022-04-19 19:17:11
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籽諾season

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 花輪君 at 2022-04-19 19:17:11
浓度不够吗?

我还没有测浓度 但是离子交换层析有峰

发自小木虫Android客户端
3楼2022-04-20 08:21:34
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absinbio

捐助贵宾 (初入文坛)


【答案】应助回帖

从题主的问题来看,应该是已经考染过page胶了,如果默认纯化有效的话,可以提高蛋白上样量,同时也可以用BCA蛋白定量来看下纯化液中的蛋白含量。

爱必信生物可以提供高质量BCA定量试剂盒:https://www.absin.cn/bca-protein-assay-kit/abs9232.html
4楼2022-04-25 17:05:08
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籽諾season

新虫 (正式写手)

自己找到原因了 浓度不够 增大了上样量 增大了浓度

发自小木虫Android客户端
5楼2022-05-27 21:37:41
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岸上手牵手

新虫 (小有名气)

您好,楼主,我最近也在做菌体代谢产物抑菌物质的的分离,看文献硫酸铵沉淀蛋白后,进行层析分离,但自己没做过层析,实验室师兄师姐也没做过,(实验室还没有器材,都需要购买,老师让我自己买,可我自己还不太懂,好多地方不理解),实验停在了硫酸铵沉淀透析后。想麻烦问问楼主能否方便指导一下。QQ2508900653

发自小木虫Android客户端
6楼2022-09-02 10:10:28
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