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hawkyin

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC检测波长的选择?

HPLC分析3个中药皂苷成分,3个成分用甲醇溶解后进行波长扫描:最大波长分别为212nm,270nm,285nm,流动相是乙腈-水的梯度洗脱,请问我该如何选择合适的波长,使3个组分在同一紫外波长下检测出呢?

大家都来帮忙给我点好的建议哦,现谢谢啊!

[ Last edited by hawkyin on 2009-10-12 at 21:24 ]
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ynmyx

至尊木虫 (职业作家)


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波长的选择依据为紫外的最大吸收波长
......别人笑我太疯癫,我笑他人看不穿;不见五陵豪杰墓,无花无酒锄作田!
2楼2009-09-07 14:10:45
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笨学生

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有CAD 就没必要非得在同一波长下测定!
3楼2009-09-07 14:16:40
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hawkyin

至尊木虫 (正式写手)

没有DAD或多波长检测器  所以只能选择单波长
4楼2009-09-07 16:04:01
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可乐=枫

荣誉版主 (知名作家)

简单快乐

优秀版主优秀版主

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 9-7 19:06
按照楼主提供的信息,非要选一个波长分析三种成分是不可能的。

但是,如果选择检测波长不以最大吸收为标准,而是参考其他性质,只要保证吸光度在0.3-0.7(或者更宽泛一点0.2-0.8)就可以考虑作为检测波长。前提是要得到三组成分紫外吸收光谱图进行综合分析、比较。
做事认真就好,做人快乐就好。
5楼2009-09-07 16:17:06
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lazierboy

专家顾问 (正式写手)

可以做出三种成分的紫外吸收曲线,再选择合适的波长……
6楼2009-09-07 16:48:47
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TMEDA

禁虫 (职业作家)

本帖内容被屏蔽

7楼2009-09-10 20:45:18
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netscaner

木虫 (正式写手)


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没有DAD你可以选波长最短的。
但是,干扰会增大,噪音会增大。
天道酬勤!
8楼2009-09-10 21:02:01
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hxz10147263

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
选择波长干扰最小的检测
也就是说杂质主结构和你的待检物质主结构差别最大的吸收峰
9楼2009-10-26 10:39:06
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glenn_007

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要结合三种物质的紫外吸收图谱比较才能总结出,
(1)我注意到你有一个的最大吸收波长为212nm,对于低波长,一般都是杂质较多,如果样品比较杂,HPLC想达到基线分离比较难,而且基线也很难平衡。
(2)波长选择的原则是尽量选择在杂质吸收低,样品吸收高的波段。
(3)也可以考虑用第二大吸收峰作为检测波长,同时也要注意选择的波长要处于峰尖位置或上升趋势位置。
10楼2009-10-26 11:27:40
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