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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】HPLC检测波长的选择？
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hawkyin

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC检测波长的选择？

HPLC分析3个中药皂苷成分，3个成分用甲醇溶解后进行波长扫描：最大波长分别为212nm，270nm，285nm，流动相是乙腈-水的梯度洗脱，请问我该如何选择合适的波长,使3个组分在同一紫外波长下检测出呢？

大家都来帮忙给我点好的建议哦，现谢谢啊！

[ Last edited by hawkyin on 2009-10-12 at 21:24 ]
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1楼 2009-09-07 14:01:34
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ynmyx

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
波长的选择依据为紫外的最大吸收波长
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......别人笑我太疯癫，我笑他人看不穿；不见五陵豪杰墓，无花无酒锄作田！
2楼2009-09-07 14:10:45
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笨学生

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有CAD 就没必要非得在同一波长下测定！
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3楼2009-09-07 14:16:40
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hawkyin

至尊木虫 (正式写手)
没有DAD或多波长检测器  所以只能选择单波长
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4楼2009-09-07 16:04:01
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可乐=枫

荣誉版主 (知名作家)

简单快乐

优秀版主优秀版主
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 9-7 19:06
按照楼主提供的信息，非要选一个波长分析三种成分是不可能的。

但是，如果选择检测波长不以最大吸收为标准，而是参考其他性质，只要保证吸光度在0.3-0.7（或者更宽泛一点0.2-0.8）就可以考虑作为检测波长。前提是要得到三组成分紫外吸收光谱图进行综合分析、比较。
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做事认真就好，做人快乐就好。
5楼2009-09-07 16:17:06
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lazierboy

专家顾问 (正式写手)
可以做出三种成分的紫外吸收曲线，再选择合适的波长……
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6楼2009-09-07 16:48:47
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TMEDA

禁虫 (职业作家)
本帖内容被屏蔽
7楼2009-09-10 20:45:18
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netscaner

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没有DAD你可以选波长最短的。
但是，干扰会增大，噪音会增大。
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天道酬勤！
8楼2009-09-10 21:02:01
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hxz10147263

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
选择波长干扰最小的检测
也就是说杂质主结构和你的待检物质主结构差别最大的吸收峰
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9楼2009-10-26 10:39:06
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glenn_007

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要结合三种物质的紫外吸收图谱比较才能总结出，
（1）我注意到你有一个的最大吸收波长为212nm，对于低波长，一般都是杂质较多，如果样品比较杂，HPLC想达到基线分离比较难，而且基线也很难平衡。
（2）波长选择的原则是尽量选择在杂质吸收低，样品吸收高的波段。
（3）也可以考虑用第二大吸收峰作为检测波长，同时也要注意选择的波长要处于峰尖位置或上升趋势位置。
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10楼2009-10-26 11:27:40
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