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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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实验做不完

新虫 (初入文坛)

[交流] 稳定细胞株系构建问题请教

各位前辈,本人在构建稳定细胞株系时,遇到一个问题一直未能解决,即在筛选单个克隆时,经过两周培养,96孔培养板中细胞始终不增殖,这是为何?我培养的是293悬浮细胞,铺板密度是0.8个/孔,共铺板600个,静置放在37℃,5%CO2培养箱中培养。恳请指教
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ljh2222

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
293细胞本身就不适合构建稳转细胞株,可以考虑替换细胞系 如CHOS K1。 如果仍要使用293构建建议:1、确保空细胞能适应96孔板体系正常生长。2、保证生长因子充分,可以在铺单克隆的时候可以做混料:新鲜培养基+293空细胞细胞上清 2:1混合。  3、如果是纯CD培养基的话建议做一些培养基筛选,推荐OPMCD05培养基。       希望对你有所帮助。
2楼2022-04-25 15:10:13
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