24小时热门版块排行榜    

查看: 683  |  回复: 1
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 实验做不完 的 5 个金币

实验做不完

新虫 (初入文坛)

[交流] 稳定细胞株系构建问题请教

各位前辈,本人在构建稳定细胞株系时,遇到一个问题一直未能解决,即在筛选单个克隆时,经过两周培养,96孔培养板中细胞始终不增殖,这是为何?我培养的是293悬浮细胞,铺板密度是0.8个/孔,共铺板600个,静置放在37℃,5%CO2培养箱中培养。恳请指教
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljh2222

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
293细胞本身就不适合构建稳转细胞株,可以考虑替换细胞系 如CHOS K1。 如果仍要使用293构建建议:1、确保空细胞能适应96孔板体系正常生长。2、保证生长因子充分,可以在铺单克隆的时候可以做混料:新鲜培养基+293空细胞细胞上清 2:1混合。  3、如果是纯CD培养基的话建议做一些培养基筛选,推荐OPMCD05培养基。       希望对你有所帮助。
2楼2022-04-25 15:10:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 实验做不完 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 考研一志愿南京理工大学化学工程专硕311分求调剂 +3 宁倾衍 2026-03-07 3/150 2026-03-14 05:13 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工290求调剂 +8 Nebulala 2026-03-08 9/450 2026-03-14 04:55 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +3 。。陈 2026-03-08 3/150 2026-03-14 04:50 by JourneyLucky
[考研] 081700一志愿211 276 四级已过 求调剂 +3 地球绕着太阳转 2026-03-08 4/200 2026-03-14 03:44 by JourneyLucky
[考研] 310 070300化学求调剂 +5 扑风铃的猫 2026-03-08 6/300 2026-03-14 03:22 by JourneyLucky
[考研] 328,0703考生求调剂,一志愿为东北师范大学 +4 观素律 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:24 by JourneyLucky
[考研] 考研材料与化工,求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:14 by JourneyLucky
[考研] 0703求调剂 +7 jtyq001 2026-03-10 7/350 2026-03-14 01:06 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 材料工程专硕,一志愿中国矿业大学,总分314,求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 0703,333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[文学芳草园] 伙伴们,祝我生日快乐吧 +12 myrtle 2026-03-10 17/850 2026-03-13 22:00 by angelyueyi
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 一志愿华中师范071000,325求调剂 +5 RuitingC 2026-03-12 5/250 2026-03-13 10:43 by hyswxzs
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考研] 081200计算机科学与技术数一英一306求调剂 +3 intankt 2026-03-08 3/150 2026-03-11 10:50 by dandan413
[考研] 086000生物与医药319分求调剂 +4 Tolkien 2026-03-07 8/400 2026-03-10 21:34 by Tolkien
信息提示
请填处理意见