24小时热门版块排行榜    

查看: 1823  |  回复: 6
【悬赏金币】回答本帖问题,作者许阿君将赠送您 10 个金币

许阿君

新虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母GS115表达

各位虫友们好,我是做毕赤酵母转化的,载体为pPICZαA,现在遇到了表达的抗菌肽无活性的问题。操作:
挑多个单菌落于25mlBMGY(250ml锥形瓶)培养基中,养一天半左右,换成200ml的BMMY培养基(500ml锥形瓶),每天加甲醇诱导,但是没有活性(上半年养的最后一批上清也没有抑菌圈,但是过了一个寒假,放在四度里,又有活性了)
此外,在BMGY培养基里养的时候,浓度也上不去,到达不了文献里说的那么高(要求OD600达到8.0)

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ericdoner

新虫 (初入文坛)

BMGY时间再长点?我们BMGY摇过三天

发自小木虫IOS客户端
2楼2022-04-09 08:07:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ericdoner

新虫 (初入文坛)

而且建议等体积更换,即多少BMGY就换到多少BMMY中,不要做稀释,同时培养基体积不应该超过瓶体积的1/3。

发自小木虫IOS客户端
3楼2022-04-09 08:08:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
4楼2022-04-09 08:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许阿君

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ericdoner at 2022-04-09 08:08:53
而且建议等体积更换,即多少BMGY就换到多少BMMY中,不要做稀释,同时培养基体积不应该超过瓶体积的1/3。

感谢虫友,现在已经排除了BMGY浓度过低的问题,正在做等体积交换培养基,看看是否会好

发自小木虫Android客户端
5楼2022-04-21 22:48:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

澜沧的爱

新虫 (小有名气)

我觉得诱导表达完之后,跑蛋白电泳看下有没有目的条带。确定下是没有表达还是表达了没活性

发自小木虫Android客户端
6楼2022-04-22 07:09:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许阿君

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ericdoner at 2022-04-09 08:08:53
而且建议等体积更换,即多少BMGY就换到多少BMMY中,不要做稀释,同时培养基体积不应该超过瓶体积的1/3。

还有个问题,你的酵母菌株是从原板上表达的,还是冻存了甘油菌以后重新表达的呢

发自小木虫Android客户端
7楼2022-04-23 16:43:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 许阿君 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 12:41 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 13/650 2026-11-06 12:30 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 12:21 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 12:08 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 12:08 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +9 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 21/1050 2026-11-06 11:26 by 2lRNluKrJpwL
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 4/200 2026-11-06 02:37 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[基金申请] 各位基础老师们,看完中央《从严治党》的决定后,对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
请填处理意见