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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细菌同源重组双交换问题。
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Ffffword

新虫 (小有名气)

[交流] 细菌同源重组双交换问题。 已有3人参与

我用的pDM4同源重组对细菌进行基因敲除。接合后用双抗平板筛出单交换菌株。然后20%蔗糖LB液体里面培养12小时后在20%蔗糖LB平板上划线，长出来的菌在氯霉素平板上也能长。这样一直筛不到氯霉素抗性消失的双交换菌株。有没有遇到过这种情况的友人能分享一下经验

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1楼 2022-03-31 10:12:59
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MAIT

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我想问一下，将T4连接产物转化进入S17-1的时候，你的板子上多就会长出菌来呀？
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2楼2022-05-10 21:15:33
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linounuo

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by MAIT at 2022-05-10 21:15:33
我想问一下，将T4连接产物转化进入S17-1的时候，你的板子上多就会长出菌来呀？

你解决了吗？我长出来是一片菌苔，然后用PBS冲洗下来之后涂板，第一次双抗筛选还是一篇菌苔
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3楼2022-10-28 20:51:31
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Ffffword

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by linounuo at 2022-10-28 20:51:31
你解决了吗？我长出来是一片菌苔，然后用PBS冲洗下来之后涂板，第一次双抗筛选还是一篇菌苔...

验证一下抗性对不对

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4楼2022-11-01 15:02:16
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清醒的瞌睡虫

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，请问问题解决了吗？双交换都是野生的，有什么方法可以借鉴一下吗
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5楼2025-05-22 16:31:13
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