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liby

铜虫 (初入文坛)

[交流] 转化问题

目的基因和9K用Snab1、Not1酶切后,16度连接,转大肠。用3‘AOX、5’AOX做引物进行菌液PCR,电泳结果是600bp处有带,没我的目的基因,是怎么回事啊
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paulajjh

木虫 (著名写手)

你用酶切检测试试
2楼2009-09-05 11:00:37
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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)

你是双酶切啊,那连接成功率会变得很低,因为这样要进行双交换,改成单酶切会好一点!
砖石王老三!!!
3楼2009-09-05 14:05:49
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liby

铜虫 (初入文坛)

不能单酶切还得表达呢,关键还是分步酶切
4楼2009-09-09 16:06:58
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你提质粒后再做一下PCR验证,有时候用菌液做不出来,用质粒就可以做出来!
一个人可以不成功,但不可以不成长!
5楼2009-09-09 17:12:35
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gastrodia

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切完全否,有无电泳图?如果酶切没有切好,那么后面的连接就会有问题,如果连接没有问题,最好是抽提质粒再PCR
6楼2009-09-09 21:32:26
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