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为什么SDS-PAGE中同一蛋白质，加了没加beta-巯基乙醇的会比加了beta-巯基乙醇的跑的更快呀，不是说SDS-PAGE蛋白质迁移速率只和蛋白质的分子量有关吗 发自小木虫IOS客户端 |
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蔚灵海
铜虫 (正式写手)
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2楼2022-03-28 18:15:34
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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影响蛋白电泳速率的因素有几点：蛋白分子量，蛋白带电荷量，蛋白空间结构，以及电泳体系与凝胶浓度。 而SDS-PAGE之所以说蛋白质电泳速率只和蛋白质分子量有关，是因为说的是变性还原性电泳，即loading buffer中含有DTT（或β-巯基乙醇）和SDS，只在这个情况下，才会只与分子量有关。 SDS携带负电荷，会与蛋白质结合，大量的SDS携带的负电荷，使得蛋白本身携带的电荷影响忽略不计，因此，排除了蛋白带电荷量对电泳速率的影响。 同时SDS作为变性剂，会使得所有的蛋白都在结构上呈现棒形，同时DTT（或β-巯基乙醇）作为还原剂，可以打开蛋白的二硫键，两者共同作用，排除了不同蛋白的空间结构对电泳速率的影响。 因此，最后只与蛋白分析量相关了，而你做了β-巯基乙醇是否添加的实验，就是改变了这个条件，电泳速率肯定是会发生变化的 |
3楼2022-09-07 11:36:39
4楼2022-10-23 07:24:23