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anik

银虫 (正式写手)

[交流] 求教

从一载体中单酶切一段序列，然后需要定向插入另一载体中（同样的单酶切），如何处理定向的问题？
谢谢。。。
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1楼 2009-09-04 15:39:45
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小瞥

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★
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司马诸葛(金币+2,VIP+0):奖励一下 9-5 22:46
有两种办法:
1.测序
2.再找其他酶切位点，酶切验证
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2楼2009-09-04 15:53:56
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银杏下

金虫 (小有名气)
★ ★
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司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 9-5 22:46
最好是先利用基因内的一个酶切位点及载体上的一个酶切位点进行酶切鉴定切出大小符合预期后再去测序。
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3楼2009-09-04 17:16:35
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wrb456

铜虫 (初入文坛)
★
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可以利用你序列中的一些酶切位点来鉴定！
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4楼2009-09-04 23:53:14
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rosalie161

金虫 (正式写手)
两个方向都有可能，检验的方法就是测序！
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Rosalei.....
5楼2009-09-05 11:23:17
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anik

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by rosalie161 at 2009-9-5 11:23:
两个方向都有可能，检验的方法就是测序！

有没有不是马后炮的方法？
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6楼2009-09-05 21:49:35
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★
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司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 9-5 22:47
不是马后炮的方法我还真不知道，你PCR就可以确定方向，使用一个基因引物，一个载体引物，根据扩出目的条带的大小来确定插入方向
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7楼2009-09-05 22:16:28
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