24小时热门版块排行榜    

查看: 680  |  回复: 6
当前主题已经存档。

victor1115

铜虫 (小有名气)

[交流] PAGE电泳技术求助

方法是后染法
20%PAGE,GelRed染色
每次跑电泳出来的胶
染色后在紫外灯下观察感觉比较模糊
条带不清晰,重复好多次都是这样
不知为何

有没有这方面的达人给与指教,万谢!

[ Last edited by victor1115 on 2009-9-4 at 13:26 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瞥

铁虫 (小有名气)


victor1115(金币+1,VIP+0):谢谢回复 9-4 16:07
1.是不是你的胶浓度太大,胶是否做的很好
2.时间染久了,DNA会弥散
3.最后可能是DNA的问题了。
2楼2009-09-04 16:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

victor1115

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 小瞥 at 2009-9-4 16:06:
1.是不是你的胶浓度太大,胶是否做的很好
2.时间染久了,DNA会弥散
3.最后可能是DNA的问题了。

1、DNA是28个碱基,20%胶应该是合适的。做胶过程应该没有杂质,不过可能密封有点问题,制胶的过程中角上的一块会流下,这会不会造成胶版密度不均一?
2、染30min而已,染时间太短又没有
3、DNA是没有问题的,在公司定的商品DNA
3楼2009-09-04 16:10:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

银杏下

金虫 (小有名气)


victor1115(金币+1,VIP+0):谢谢 9-4 18:03
根据我利用page跑蛋白电泳的情况来看,这种胶稍微有些没混匀就会导致条带不清晰,所以我建议你充分混匀胶后再试试。
4楼2009-09-04 17:13:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holyala

木虫 (著名写手)

砖家


victor1115(金币+1,VIP+0):谢谢 9-4 18:03
如果确定胶都没问题,考虑用较低的电压,延长电泳时间,效果可能会好一点。
5楼2009-09-04 17:19:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioxixi

木虫 (著名写手)


victor1115(金币+1,VIP+0):谢谢 9-4 18:03
胶的浓度太大,片段又太小,所以对胶的质量要求就比较高了,稍有不均匀就直接影响条带了,重新做胶试试吧。这么小的条带是不是该用很小的电压跑啊,否则也会扭曲的。
6楼2009-09-04 17:29:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

changes

木虫 (正式写手)


victor1115(金币+1,VIP+0):谢谢 9-22 14:06
引用回帖:
Originally posted by bioxixi at 2009-9-4 17:29:
胶的浓度太大,片段又太小,所以对胶的质量要求就比较高了,稍有不均匀就直接影响条带了,重新做胶试试吧。这么小的条带是不是该用很小的电压跑啊,否则也会扭曲的。

赞同,浓度确实有些高了,15%的应该也可以了。功率降低些试试。
7楼2009-09-04 21:38:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 victor1115 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:41 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 04:21 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见