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jing_588

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】关于反相柱和正相柱

反相柱和正相柱有什么区别,分别适用于哪种样品
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happyeveryday

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liujunhero at 2009-9-4 07:23:
⑴反相柱:填料是非极性的,官能团为烷烃,例如:C18(ODS)、C8、C4等。
⑵正相柱:填料是极性的,官能团为-CN氰基、-NH2氨基等。
"C18",简称"ODS",即十八烷基硅烷键合硅胶填料(Octa ...

楼上可以解释下为什么做生物分子的时候要用含碳量小的键合相?
5楼2009-09-04 11:09:40
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lankywang

金虫 (著名写手)


jing_588(金币+1,VIP+0): 9-6 21:40
正相,是固定相比流动相极性大,适合做极性物质,

反相柱,流动相极性比固定相极性大,适合做非极性化合物,
所以流动相都是极性比较大的,水,甲醇,乙腈组成
2楼2009-09-03 22:50:35
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mikeliubao

金虫 (小有名气)


jing_588(金币+1,VIP+0):谢谢,领教了 9-6 21:41
我们一般说反相色谱和正相色谱,反相色谱就是固定相的极性小于流动相,正相色谱则相反。

这样引伸出来一个反相柱和正相柱。目前,一般反相柱就是在高纯硅胶基质上键合上一定的非极性基团或极性较低的基团的柱子。而正相柱一般是完全裸露的羟基基团或氧化铝。

至于使用的范围就简单了。色谱的原理就是溶质在固定相和流动相之间的反复分配造成分离。这样的话,你想,如果非极性的化合物在正相柱上的固定相上没有作用力或作用力很小,你说这样能完成分离或分离效果会好吗?

顺便提一下,现在正相色谱使用的比较少。首先,正相色谱一般用非极性的流动相如正己烷等,这样系统中应避免进入水分等难溶或不不溶物质;其次,现在有很多衍生手段或流动相添加剂使一些极性化合物在反相柱上保留分离。
3楼2009-09-04 02:17:45
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liujunhero

新虫 (文学泰斗)

文献杰出贡献文献杰出贡献


jing_588(金币+1,VIP+0): 9-6 21:41
⑴反相柱:填料是非极性的,官能团为烷烃,例如:C18(ODS)、C8、C4等。
⑵正相柱:填料是极性的,官能团为-CN氰基、-NH2氨基等。
"C18",简称"ODS",即十八烷基硅烷键合硅胶填料(Octadecylsilyl,简称ODS)。这种填料在反相色谱中发挥着极为重要的作用,它可完成高效液相色谱70~80%的分析任务。由于C18(ODS)是长链烷基键合相,有较高的碳含量和更好的疏水性,对各种类型的生物大分子有更强的适应能力,因此在生物化学分析工作中应用的最为广泛,近年来,为适应氨基酸、小肽等生物分子的分析任务,又发展了CH、C3、C4等短链烷基键合相和大孔硅胶(20~40μm)。
4楼2009-09-04 07:23:01
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