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hglxy2008金虫 (小有名气)
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[交流]
送10分，有称作 “ x-gal” 大肠杆菌感受态菌株吗？
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我初入分子生物实验，分不清楚大肠杆菌感受态有哪些种类。一个是DH5α；还有同类的叫做x-gal或者类似这样发音的（我不敢保证拼写正确）。 恳请知道的朋友告诉我后者的正确拼写，这样至少我可以上网查到相关信息。如果您知道或手头有相关信息，斗胆恳请您告诉我！ 谢谢！ [ Last edited by hglxy2008 on 2009-9-7 at 19:06 ] |
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hglxy2008
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9楼2009-09-04 01:07:34
xingjian1
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X–Gal（5–Bromo–4–Chloro–3–Indolyl–β–D–Galactoside）使用说明书 储运温度： ―20℃ 形态：白色粉末 分子量：408.6 ◆ 作为β–galactosidase的底物进行了生物活性检定。 ◆ 通过TLC分析确定纯度。 用 途 ： X–Gal是β–半乳糖苷酶（β–galactosidase）的底物，水解后呈蓝色。基于这个特点，pUC系列载体DNA（或其他带有lacZ 基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。 使用方法 ： 首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（-20℃避光保存），然后在100 ml的琼脂培养基中，加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG（24 mg/ml）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化至lacZ缺失细胞中后，涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培养基，可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组体）。 注意事项 ： ◆ 培养噬菌体时，Top agar中的添加量为：50 μl/3 ml（20mg/ml）。 ◆ 含有X-Gal的培养基4℃避光保存，须在1~2周内使用。 [ Last edited by xingjian1 on 2009-9-3 at 21:16 ] |
3楼2009-09-03 20:50:43
xingjian1
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X-Gal也称5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside或5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside，中文名为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷。分子式为C14H15BrClNO6，分子量为408.63，CAS Number 7240-90-6，纯度>99%。进口分装。 本产品为白色至浅黄色粉末。 X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物，在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。 溶于DMSO，溶解度可达20mg/ml。也溶于DMF。 保存条件： -20℃避光保存。 注意事项：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 [ Last edited by xingjian1 on 2009-9-3 at 21:18 ] |
4楼2009-09-03 20:53:02
xingjian1
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X–Gal（5–Bromo–4–Chloro–3–Indolyl–β–D–Galactoside）使用说明书 Code No.： 包 装 量 ： 100mg 价格： 储运温度 ： ―20℃ 形 态 ： 白色粉末 分 子 量 ： 408.6 纯 度 ： ◆ 作为β–galactosidase的底物进行了生物活性检定。 ◆ 通过TLC分析确定纯度。 用 途 ： X–Gal是β–半乳糖苷酶（β–galactosidase）的底物，水解后呈蓝色。基于这个特点，pUC系列载体DNA（或其他带有lacZ 基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。 使用方法 ： 首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（-20℃避光保存），然后在100 ml的琼脂培养基中，加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG（24 mg/ml）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化至lacZ缺失细胞中后，涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培养基，可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组体）。 注意事项 ： ◆ 培养噬菌体时，Top agar中的添加量为：50 μl/3 ml（20mg/ml）。 ◆ 含有X-Gal的培养基4℃避光保存，须在1~2周内使用 |
5楼2009-09-03 21:10:01
