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chirmas0929

银虫 (小有名气)

[交流] 扩增病毒遇到的问题

扩增病毒遇到的问题


我现在在用293扩增已包装好的腺病毒。病毒原液滴度有点高,我100ml培养瓶,加3微升,48小时就有细胞浮起了,也有荧光表达。所以我2瓶100ml细胞收成1ml后反复冻融3次后收到-80保存(未分装)。
现在我拿我自己第一次扩增的病毒液进行第二轮扩增,同样100ml培养瓶中加入5微升第一轮病毒液,24小时候无荧光,之后我补加了10微升,48小时候有大量荧光,但不强,因此我觉得是对的,因为72小时理论上应该荧光更强些。结果今天72小时去看,6瓶细胞中3瓶浮起了,而且无荧光。另外3瓶浮起一小部分,但是也无荧光。我实在不知道是什么原因,因为我扩增这个病毒扩了好几个月了,心里十分着急,害怕毕不到业。。。不知道是不是荧光显微镜的原因,因为我中间48小时那次的观察换了个实验室的显微镜看的。可是我的实验室老师坚持说我们实验室的显微镜没问题(即我24小时和72小时观察用的显微镜),因为其他同学观察到的荧光的确是很好,很正常的。
麻烦各位高手为我解答一下我的困惑,万分感谢。

[ Last edited by amisking on 2009-9-3 at 17:34 ]
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