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[交流] 【推荐】Geno2000高通量组织研磨机(spex)已有1人参与

这个设备或许大家需要，在此做简单介绍。欢迎留言联系。

SPEX的Geno2000高通量组织研磨机是杜邦旗下先锋种业(pioneer Hybrid international)专门为分子生物学方面研究而研发的一款新型高通量组织研磨机，最大通量接近400，可一次同时研磨384 个样品。特别适用于植物组织中核酸，蛋白和其它成分的提取。研磨样品包括植物的根、茎、叶、花、果、种子和某些动物组织。另外Geno2000还可以对酵母、培养的动物细胞、细菌细胞等进行破碎，从而提取其中的组分。
由于采用了独一无二的垂直上下震动模式，Geno2000研磨的样品具有研磨更加充分、更均匀、样品重复性更好、样品之间没有交叉污染等优点，是真正的高通量组织研磨机。
Geno2000跟传统的研磨机相比具有如下明显的优点：
一，Geno2000采用独一无二的垂直上下震动研磨方式，这是它跟传统研磨机的最大区别。正是由于采用垂直上下研磨方式，在研磨的过程中，Geno2000的研磨球能够对样品进行更高能量的碰撞（样品管或离心管是竖直插在水平放置的深孔板中的，这样，由于重力作用，样品一直保持在管底；研磨球上下震荡，就能对样品进行正面碰撞。而在传统的研磨机中，样品管或离心管是水平插在竖直放置的深孔板中的；由于采用水平左右震荡的方式，样品一直保持在管壁；研磨球左右震荡，没有正面与样品进行碰撞，更多的是通过摩擦的方式进行研磨。）从而样品得到充分的研磨。
二，在Geno2000中，插放有样品管的孔板是水平放置的，而且在研磨的过程是通过固定孔板的四个角而将孔板和震动装置联系在一起的。因而，在研磨的过程中，板孔中不同位置的样品管内样品被研磨的程度是一致的，即样品研磨的重复性好，批间差小，能够确保后续试验的顺利进行以及数据的可靠性。在传统的研磨机中，插放有样品管的孔板是竖直放置的；而且震动装置从孔板的中心穿过，在研磨的过程，震动从板孔的中心往板孔的四周扩散；因此，板孔中心位置的样品受到的能量要高于四周的样品，即样品研磨的批间差大，重复性不好，后续试验的顺利进行和数据的可靠性得不到保证。
三，在Geno2000中，插放有样品管的孔板是水平放置的，样品管则为竖直状态，在研磨的过程中样品一直保持在管底，不容易从样品管口处出来；而在传统的研磨机中，插放有样品管的孔板是竖直放置的，样品管则为水平状态，在研磨的过程中样品一直保持在管壁或一直有留在管壁的趋势，容易从样品管口处出来。跟传统研磨机相比，Geno2000能够更好地减少不同样品之间的交叉污染。
四，Geno2000的最高通量为384，一次能研磨将近400个样品；而传统研磨机所能达到的最高通量为192。
五具有冷冻研磨功能：可将样品在液氮中预冷，再进行研磨。铝合金支架可以在短时间内保持低温，而一般研磨耗时在2分钟之内，这样样品可以在冷冻条件下进行研磨。

应用概要：
植物组织核酸提取
从完整种子中分离核酸需要先机械粉碎种子再提取和纯化核酸。机械破碎通常是人工采用研钵和杵进行研磨的方式，这种方法不适合高通量的种子破碎，因为人工研磨很慢而且研钵和杵的重复使用也可能导致交叉污染。种子的核酸可以通过微孔板的方式用Geno/Grinder仪器机械研磨种子而分离得到。再用传统的分离方法就可以从匀浆液中纯化出核酸。用水浸泡过夜的大豆可在3分钟内高效而一致地被均质化。均质化的果浆可以作为DNA分析的材料。
从培养的细胞中快速提取基因组DNA为PCR分析做准备
PCR在科学家为了研究和诊断而对核酸进行检测和定量测序的能力方面起到了革命性的作用。但是，这个过程并不快，因为PCR方法通常需要在模板扩增前有一个纯化步骤。这包括细胞收集和/或核酸溶解，接下来用层析树脂把核酸从裂解液中分离出来。虽然这些纯化方法已经发展到快速的程度，但是它们仍然需要耗费时间和一些在高通量环境中可能很昂贵的材料。
Geno技术是一种快速和低成本的为PCR分析而从培养的细胞中提取基因组DNA的方法。这个方法围绕着细胞的简单均质化并通过层析树脂或柱进行核酸纯化的方法并提高对裂解液进行PCR的效率。这个方法是为微孔板而研制的，所以自然适合高通量的操作。
酵母的96孔高通量破碎多年的生物化学、基因学和分子生物学研究取得的丰富信息表明，酵母已经成为生物系统的模型和生物药学家的有力工具。所以，酵母已成为一个基因表达研究和蛋白质充足的宿主。包括Picbia、Hansenula、Debaryomyces，但使用最普遍的仍然是Saccbatomyces酵母。
酵母mRNA和细胞内蛋白通常很难用传统的酶解方法从细胞冲完整地提取出来。裂解酶中通常包括含有核糖核酸酶和蛋白，它们不仅会攻击细胞壁，而且会攻击特定的分子。并且，由酶解产生的原生质体通常需要用实际溶解而导致很多蛋白质变性失活。因此，机械破碎酵母细胞则被广泛应用。对于必须高通量检测大量酵母克隆的实验而言，可以用Geno以微孔板的方式破碎酵母。
细菌细胞的裂解（盐蛋白菌和杆菌）
Geno能通过弹道学的方法裂解细菌细胞。应用格兰氏阴性耐盐菌著名的Halomonas elongate或格兰氏阳性杆菌，已经发展了两种技术。有机体培养，收获并冲洗掉多余的培养基，一个细胞小球悬浮在盐水溶液中，并且在Geno仪器中用研磨介质震荡，至6-9分钟的时候能够产生足以检测到的核酸量。

[ Last edited by amisking on 2010-1-4 at 21:38 ]

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