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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC的样品预处理和测定问题
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laidewanle

木虫 (著名写手)

小木虫夜游神

[交流] HPLC的样品预处理和测定问题

各位好，没用过液相， 现在想要用HPLC检测药品在分离提纯一系列过程中A、 B 、C三个组分的含量变化。问题是样品有时候在成分复杂的水溶液中（几种金属离子 蛋白 色素等），有时候在醇溶剂中，有时候在醇溶剂和盐酸的混合溶液中，脱色最后才是成品。因为主要检测这些过程中几个组分的含量变化，所以不能也不易每步都得出样品干粉。
    请问能直接进样么（有时候水溶液，有时候醇溶液，有时候含醇的水溶液）？不同溶剂对峰的保留时间和含量的测定有影响没？是不是还需要每次洗柱子啊？或者怎么处理下？

水溶液可以离心过滤， 甚至活性炭脱色，是不是要把蛋白用什么东东滤去啊？醇是丁醇（所以会和流动相中的水溶解不太好），不过液相进的样少不知道能做不？

[ Last edited by laidewanle on 2009-9-1 at 10:29 ]
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天道酬勤,一切皆有可能!
1楼 2009-08-31 18:32:01
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sjt5124

★
laidewanle(金币+1,VIP+0):谢谢 9-2 23:05
要把脂类和蛋白质去掉       否则会对柱子有损害的       有的有机分子粘在柱子上冲都冲不掉·······························
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2楼2009-08-31 18:44:29
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youarebeloved

金虫 (著名写手)
★ ★
laidewanle(金币+2,VIP+0):谢谢 9-2 23:05
蛋白质,色素都要去除,至于醇和水溶液对出峰的影响不是很大,不过这种样品进过一天后一定要用甲醇冲洗柱子
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3楼2009-08-31 20:13:09
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qwert9893

银虫 (小有名气)

要小心

★ ★ ★ ★ ★
laidewanle(金币+5,VIP+0):谢谢 9-2 23:06
你这里有大分子物质，如果进样，将永远停留在柱子里，永远。
    可以直接进样啊（有时候水溶液，有时候醇溶液，有时候含醇的水溶液），不怕，只要你把流动相比例摸索出来。不同溶剂对峰的保留时间和含量的测定有影响，这里说明一点：流动相的极性和稀释剂的极性不要差别太大。
当然要洗柱子啊，你得样品成分复杂，得多冲冲。

醇是丁醇也不怕，但不能全是丁醇，起码得有水。
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4楼2009-08-31 20:34:14
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liujunhero

新虫 (文学泰斗)

文献杰出贡献文献杰出贡献
★
laidewanle(金币+1,VIP+0):能否详细介绍以下谢谢 9-2 23:07
推荐你使用SPE固相萃取柱，就能解决你的问题了
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5楼2009-08-31 20:58:04
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laidewanle

木虫 (著名写手)

小木虫夜游神
大家有没有其他建议啊 谢谢了
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天道酬勤,一切皆有可能!
6楼2009-09-01 09:09:13
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laidewanle

木虫 (著名写手)

小木虫夜游神
大家继续讨论下啊 谢谢
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天道酬勤,一切皆有可能!
7楼2009-09-02 23:07:35
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laidewanle

木虫 (著名写手)

小木虫夜游神
求助结束谢谢大家
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天道酬勤,一切皆有可能!
8楼2009-11-15 18:24:02
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swt1898

铁虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
也可以用分散固相萃取，方法快捷
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9楼2009-11-16 00:18:03
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