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dqvictory

铁虫 (小有名气)

[交流] 求二维凝胶电泳中用到的试剂和配方,拜托诸位了!

各位虫友好!请问一下你们有谁做过二维凝胶电泳实验的啊?能不能麻烦您把所做的二维电泳的完整操作步骤及所用到的试剂还有实验心得告诉我啊,不胜感激了!如果可以的的话,可以邮箱交流:dqvictory@126.com,再次感谢啦!
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

★ ★ ★ ★
dqvictory(金币+4,VIP+0): 9-12 13:44
这个应该好查吧,网上很多啊。而且,根据你实验的需要,有些溶液的配方是不同的,所以要自己去看啊。我随便列两个主要的吧......

蛋白质裂解液(lysis buffer):6-8 mol/L 尿素,0-2 mol/L 硫脲,4% CHAPS,1% DTT
平衡缓冲液(equilibration buffer)I:36% 尿素,2% SDS,20% 丙三醇,25% 1.5 mol/L Tris-HCl(pH8.8),1% DTT
平衡缓冲液 II:36% 尿素,2% SDS,20% 丙三醇,25% 1.5 mol/L Tris-HCl(pH8.8),2.5% 碘乙酰胺

其它的就不写了,平衡缓冲液可以先配成母液,就是不加DTT和碘乙酰胺,保存在-20℃,用的时候再分别加DTT(I液)和碘乙酰胺(II液)

P.S. 碘乙酰胺剧毒,操作时一定注意安全。
3楼2009-09-07 14:43:31
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