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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 跑了三遍还没分开，说明什么？
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songe0310

木虫 (著名写手)

傻~傻得没得说的~

[交流] 跑了三遍还没分开，说明什么？

如题，只有两个成分的混合物，跑第一遍凝胶柱，上样量过大，未能分开，于是乎跑少量第二遍，两色带距离过近但能看出来是两条，点板依然未分开，跑第三遍，上样量更少，此时浓度应该和流动相差不多了吧，点板还是未分开。凝胶装柱高70cm内径1.3cm，量少怕跑硅胶损失多。请问，我该怎么把他俩分开？？？
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你就傻下去吧~~
1楼 2009-08-30 09:42:44
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木虫小小客

木虫 (正式写手)

好死不如赖活着
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
流速慢一点试试。如果不行的话可以考虑换其他的色谱方法。
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2楼2009-08-30 11:50:10
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小飞雪

★ ★
songe0310(金币+1,VIP+0): 9-5 00:07
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 9-5 00:33
流速慢点，另外洗脱剂可以稍做调整，让两种成分在洗脱过程中分得开一些，这样或许会有收获
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3楼2009-08-30 12:19:31
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xuxuan

木虫 (著名写手)

小木虫GG部部长
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 9-5 00:33
跑柱之前必须先用薄层色谱试试洗脱液，选择洗脱液是关键的一个环节，另外就是根据上样量来选择柱子的粗细，装柱子也是一个很重要的环节。哦！还有就是楼上说的那几点了。
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要毕业了，还好自己不迷茫
4楼2009-08-30 14:19:24
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tyjackie

木虫 (正式写手)
★
songe0310(金币+1,VIP+0): 9-5 00:07
洗脱剂类型、洗脱速度、柱子填料、装柱都可能对分类产生影响，如果做的很小都还是分不开，只能说明方法有问题
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5楼2009-08-30 18:49:29
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小药虫

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用的什么流动相？是不是两种物质分子量太接近，不宜用凝胶。
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6楼2009-08-30 19:29:40
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songe0310

木虫 (著名写手)

傻~傻得没得说的~
不要石沉
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你就傻下去吧~~
7楼2009-09-05 00:08:24
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匿名

用户注销 (文坛精英)
★
songe0310(金币+1,VIP+0): 9-5 22:26
本帖仅楼主可见
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8楼2009-09-05 07:18:46
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songe0310

木虫 (著名写手)

傻~傻得没得说的~
引用回帖:
Originally posted by trywpl at 2009-9-5 07:18:

需要考虑其它填料，凝胶不适合该成分的分离。

用什么填料呢，我只用过硅胶和凝胶，成分量已经很少了，如果再用硅胶的话损失更多了，可能分出来的都不够打谱了，怎么办呢
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你就傻下去吧~~
9楼2009-09-05 10:20:26
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jw227

木虫 (著名写手)

课题组长
★
songe0310(金币+1,VIP+0): 9-5 22:26
首先你点板用的是硅胶板，而你上柱用的是凝胶，不具有完全的可比性，如果用的是sephadex，可以适当加长柱高度，减少上样量，不过建议用C18反相损失较少，效果应该不错。
赞一下(1人) 回复此楼
我是来消遣的
10楼2009-09-05 18:10:35
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