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songe0310

木虫 (著名写手)

傻~傻得没得说的~

[交流] 跑了三遍还没分开,说明什么?

如题,只有两个成分的混合物,跑第一遍凝胶柱,上样量过大,未能分开,于是乎跑少量第二遍,两色带距离过近但能看出来是两条,点板依然未分开,跑第三遍,上样量更少,此时浓度应该和流动相差不多了吧,点板还是未分开。凝胶装柱高70cm内径1.3cm,量少怕跑硅胶损失多。请问,我该怎么把他俩分开???
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你就傻下去吧~~
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木虫小小客

木虫 (正式写手)

好死不如赖活着


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
流速慢一点试试。如果不行的话可以考虑换其他的色谱方法。
2楼2009-08-30 11:50:10
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小飞雪

★ ★
songe0310(金币+1,VIP+0): 9-5 00:07
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 9-5 00:33
流速慢点,另外洗脱剂可以稍做调整,让两种成分在洗脱过程中分得开一些,这样或许会有收获
3楼2009-08-30 12:19:31
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xuxuan

木虫 (著名写手)

小木虫GG部部长

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 9-5 00:33
跑柱之前必须先用薄层色谱试试洗脱液,选择洗脱液是关键的一个环节,另外就是根据上样量来选择柱子的粗细,装柱子也是一个很重要的环节。哦!还有就是楼上说的那几点了。
要毕业了,还好自己不迷茫
4楼2009-08-30 14:19:24
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tyjackie

木虫 (正式写手)


songe0310(金币+1,VIP+0): 9-5 00:07
洗脱剂类型、洗脱速度、柱子填料、装柱都可能对分类产生影响,如果做的很小都还是分不开,只能说明方法有问题
5楼2009-08-30 18:49:29
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小药虫

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用的什么流动相?是不是两种物质分子量太接近,不宜用凝胶。
6楼2009-08-30 19:29:40
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songe0310

木虫 (著名写手)

傻~傻得没得说的~

不要石沉
你就傻下去吧~~
7楼2009-09-05 00:08:24
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匿名

用户注销 (文坛精英)



songe0310(金币+1,VIP+0): 9-5 22:26
本帖仅楼主可见
8楼2009-09-05 07:18:46
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songe0310

木虫 (著名写手)

傻~傻得没得说的~

引用回帖:
Originally posted by trywpl at 2009-9-5 07:18:

需要考虑其它填料,凝胶不适合该成分的分离。

用什么填料呢,我只用过硅胶和凝胶,成分量已经很少了,如果再用硅胶的话损失更多了,可能分出来的都不够打谱了,怎么办呢
你就傻下去吧~~
9楼2009-09-05 10:20:26
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jw227

木虫 (著名写手)

课题组长


songe0310(金币+1,VIP+0): 9-5 22:26
首先你点板用的是硅胶板,而你上柱用的是凝胶,不具有完全的可比性,如果用的是sephadex,可以适当加长柱高度,减少上样量,不过建议用C18反相损失较少,效果应该不错。
我是来消遣的
10楼2009-09-05 18:10:35
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