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i杜子

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助:怎样向培养基中加磺胺胍

要做抗性平板,LB培养基加上3%磺胺胍,pH7.0。
难点就是磺胺胍不能高温灭菌,在水中的溶解度很低。

我的做法是先灭好培养基,然后在超净台中称量定量的磺胺胍,直接倒到培养基中,再倒平板,可是磺胺胍有很多不溶的,倒出来的平板很不均匀。
不知道有没有更好的方法?


ps:磺胺胍易溶于稀盐酸,可是先配成磺胺胍的盐酸母液再加到培养基中,培养基的pH会降很多,如果再用NaOH调回来,磺胺胍不是又会很快析出来吗???

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-4 at 10:03 ]
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)


i杜子(金币+1,VIP+0):谢谢 不过在超净台里边搅拌不好做啊。 8-29 13:24
应该不会吧。
要求加3%,就说明在这个浓度下是可以完全溶解的,还没有达到饱和浓度。
你可以多搅拌一会,直到它溶解为止。
还有你调pH,应该是所有药品加完后再调pH。你把磺胺胍加进去后肯定是要调pH的。
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2楼2009-08-29 11:43:02
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i杜子

铜虫 (初入文坛)

据报道说我的那个菌的磺胺胍耐受浓度是3%,而磺胺胍的溶解度是:25℃,1g/L;100℃,100g/L;易溶于稀盐酸。

结果每次往灭好菌的培养基中加入磺胺胍,根本就溶不均匀,倒出来的平板也是有一块一块的磺胺胍的疙瘩。
3楼2009-08-29 13:11:52
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

用搅拌器搅吧。
而且好像3%远没有达到他的溶解度啊。你可以加热溶解。
生物资源交流QQ群:1044518333
4楼2009-08-29 20:23:13
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liujunhero

新虫 (文学泰斗)

文献杰出贡献文献杰出贡献


i杜子(金币+1,VIP+0):可是磺胺胍根本就不溶与水 9-1 16:02
应该用少量无菌水将磺胺胍溶解后再加入
5楼2009-08-29 20:25:17
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小桥流水5596

木虫 (小有名气)

★ ★
i杜子(金币+2,VIP+0):谢谢 9-1 16:01
ps:磺胺胍易溶于稀盐酸,可先配成磺胺胍的盐酸母液再加到培养基中,培养基的pH会降很多,再用NaOH调回来,并且用振荡器摇匀,磺胺胍应该会溶解均匀。楼主可以试试。不过溶解磺胺胍盐酸的量要注意控制一下,不然要加的NaOH会很多,盐的含量会相当高,影响实验结果
6楼2009-08-30 09:05:16
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