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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC分析方法建立
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ron212

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC分析方法建立

本人第一次接触HPLC，请教各位大虾：
我分析的是反应后混合液，需要定量。理论上，可能产物有十多种，我需要知道每种在HPLC上的停留时间吗？还是只需要知道3种目标产物的就可以了？
如果改变反应条件了，产物可能就有点不一样了，那我之前建立的分析条件还适用吗？
如果使用液质联用，是应该先确定分析条件呢？还是可以先做来定性？
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1楼 2009-08-28 12:24:47
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hgyan

金虫 (小有名气)
★
ron212(金币+1):谢谢参与
我觉得还是先定性~~~~~~~~
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2楼2009-08-28 12:42:54
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
★
ron212(金币+1):谢谢参与
看你想得到什么目标产物了，我觉得没必要先定性，再说了反应液定性应该很麻烦吧。个人觉得用适合主产物的液相条件进样来确定每种物质的保留时间，如果不确定哪个峰是哪个物质，那就进一针产物的对照就ok了，通过保留时间确定谁是谁
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药物合成
3楼2009-08-28 13:02:33
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ron212

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by hgyan at 2009-8-28 12:42:
我觉得还是先定性~~~~~~~~

你的意思就是不管其他产物了吗？可是这样就不知道反应是按那条路线进行的了。而且，分析方法一般不是还要做质量衡算吗？如果连产物是什么都不知道，那怎么衡算呢？
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4楼2009-08-28 13:16:45
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zhangsibao

木虫 (正式写手)

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★
ron212(金币+1):谢谢参与
如果楼主有质谱的话，还是应该首先进行定性。如果单纯采用液相的话，分析条件改变之后你样品中各组分的保留时间，就不相同了，所以你之前所做的标准曲线也就失效了。但是没必要知道所有物质的保留时间，只要知道你自己的目标峰的保留时间就可以了。
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5楼2009-08-28 15:42:18
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Irene敏

银虫 (小有名气)
★
ron212(金币+1):谢谢参与
一个新的HPLC方法的确定是要验证的，比如说精确度，线性，专属性等。如果峰比较多，液质联用可以对峰纯度进行检查，只有纯峰才可以用来定量。
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6楼2009-08-28 15:56:02
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liujunhero

新虫 (文学泰斗)

文献杰出贡献文献杰出贡献
★
ron212(金币+1):谢谢参与
只需要得到目标产物即可，液质联用一般和液相条件相差不多的
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7楼2009-08-28 15:59:51
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liuy_05

铁虫 (小有名气)
★ ★
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opq691(金币+1):谢谢回帖交流
我也是在做这种方法的建立,我连标准品都没有.
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8楼2009-08-28 16:20:40
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zhouqun34

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+1):谢谢回帖交流
你应该有反应的原料吧，估计一下你反应后的产物及可能的副产物和原料的极性大小可以初步的确定保留时间的范围。
先用液相确定分析物都能出峰并分离良好之后进质谱就可以定性了
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9楼2009-08-28 16:27:23
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liuy_05

铁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+1):谢谢回帖交流
楼上说的是个好方法,我就是按这个方法做的.原料反应完后,得到最大的那个峰可能就是你要的目标产物,然后再去做质谱.
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10楼2009-08-28 17:03:16
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