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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » [交流求助]悬浮细胞的MTT
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baisuilan

金虫 (正式写手)

[交流] [交流求助]悬浮细胞的MTT

请问大家悬浮细胞是怎么做MTT的？我们没有平板离心机，酶标仪只有490nm和630纳米，没有570nm.
有看到有说三联溶解液（SDS 10g， 异丁醇 5ml ， 10M HCl 0.1ml 用双蒸水溶解配成100ml溶液 ）代替DMSO就不用离心，但是波长必须在570nm~
最好给个切实可行又比较精确的Protocal，谢啦
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1楼 2009-08-28 12:23:51
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baisuilan

金虫 (正式写手)
没有知道的吗？
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2楼2009-08-29 14:31:15
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小桥流水5596

木虫 (小有名气)
这个我不清楚
不过觉得很有意思
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3楼2009-08-30 08:57:33
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
这个我做过，需要用PBS把mtt溶解了。在细胞中加mtt溶液，培养4h，再加dmso。震荡10min
，570nm检测
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4楼2009-08-30 09:03:42
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baisuilan

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by cauzhangtao at 2009-8-30 09:03:
这个我做过，需要用PBS把mtt溶解了。在细胞中加mtt溶液，培养4h，再加dmso。震荡10min
，570nm检测

关键是，我们没有570nm波长，而且，你做的是贴壁还是悬浮细胞？
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5楼2009-08-30 15:28:58
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feng6710

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by cauzhangtao at 2009-8-30 09:03:
这个我做过，需要用PBS把mtt溶解了。在细胞中加mtt溶液，培养4h，再加dmso。震荡10min
，570nm检测

用490nm的可以吗？同问！
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6楼2009-08-30 22:30:45
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
baisuilan(金币+4,VIP+0): 9-2 23:09
至于是贴壁还是悬浮，就是后期处理有点差异，贴壁细胞的话你把培养液倒掉，悬浮你需要离心倒掉不是。
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7楼2009-08-31 08:06:44
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
用MTS得了呗。
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8楼2009-08-31 09:03:06
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
用MTS省的那么麻烦了，而且线性范围和准确度都比MTTh好。
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9楼2009-08-31 21:06:48
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myhzy2819

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
baisuilan(金币+4,VIP+0): 9-2 23:09
给你一篇参考文献吧，就是改良后MTT方法
http://www.91files.com/?Z8CD9FYTKUACHN0T4LFH
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10楼2009-09-01 13:37:59
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