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【实验方法】大鼠肾脏原位移植
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大鼠肾脏原位移植手术方法: 手术在室温25 、相对湿度60%的清洁非无菌环境中进行。 1.1 10%盐酸氯胺酮注 射液和硫酸阿托品、酚妥拉明注射液、 肝素钠注射液、利多卡因注射液。 1.2 麻醉方法 10%盐酸氯胺酮注 射液,15 mg(100 g)-1,肌肉注射麻醉,术中注意保温。 1.3 科技术从供体切取双侧肾脏,放入4 肾脏保存液。左侧肾脏植入 个受体,原位端端缝合肾脏动、静脉,供肾输尿管与受体输尿管上端间断缝合6 针。右侧肾脏翻转180后植入第2 个受体左侧肾窝, 与受体的动脉、静脉、输尿管端端吻合。 1.3.1 供体手术 取十字切 口进腹,湿盐水纱布包裹肠管。仔细分离供体右侧和左侧肾脏的动、 静脉血管,分别结扎肾上腺动静脉,并使肾脏的动、静脉血管骨骼化, 利多卡因注射液滴于表面防止动脉痉挛。游离肾脏和输尿管,输尿管 在肾脏下极处离断,保留输尿管周围的脂肪组织。在切取肾脏之前 15 min,通过尾静脉注射肝素100 和甲磺酸酚妥拉明注射液(1mgkg-1)。在根部结扎左肾动静脉并离断,提起肾动脉外膜, 插入4 号灌注针进行灌注,灌注液为4 肾脏离体灌注保存液约2 ml 。同法切取灌注右侧肾脏,在根部离 断右肾动脉,带部分腔静脉壁剪取右肾静脉,保留右输尿管约2 cm。 两侧肾脏分别放入4 HCA肾脏灌注保存液中备用。 1.3.2受体准备 剑突下正中切口进腹,湿盐水纱布包裹 肠管牵向右侧。仔细分离受体左侧肾脏的动、静脉,分别结扎肾上腺 动静脉。游离肾脏,在靠近腹主动脉、腔静脉处用显微血管夹阻断左 侧肾脏的动、静脉血管,尽量靠近肾门处离断左侧肾脏的动、静脉血 管和输尿管。冰肝素盐水冲洗动、静脉管腔。 1.3.3 左侧肾脏原位 移植 左侧供肾置于受体的左侧后腹壁肾窝,冰盐水纱布垫 起并覆盖,间断滴注冰盐水保持低温,先吻合动脉,直径一般0.5 0.8mm,牵开外膜修齐动脉的末端。端端吻合动脉8～9 针,两定点 缝合,采用连续缝合间断打结的方法,一般前壁3 针后壁3 针。静脉 的直径1～1.5 mm,壁薄而娇嫩。180两定点固定,端端连续缝合, 开放血流后再收紧打结防止形成狭窄。先开放静脉再开放动脉。输尿 管的吻合:吻合口靠近受体输尿管上端,一般需要6 针间断缝合,2 针对端全层牵引线,前后壁分别2 针。通过输尿管的蠕动波、尿液通过吻合口来判断是否漏尿。 1.3.4 右侧肾脏移植侧供肾围绕其长轴旋转180,其凸起的腹侧面靠近左侧肾窝后腹壁。因翻转后原右侧肾静脉靠近背侧,一般先吻合静脉再吻合动脉,方法 同左侧供肾。右侧供肾的冷缺血时间0 min。肾静脉、肾动脉、输尿 管吻合方法同左侧供肾。 1.3.5 术后处理 缝合移植肾脏上下极的包 膜脂肪于腹后壁,以固定移植肾脏,防止血管蒂扭转。分离受体右侧 的肾脏血管,结扎切断,同期切除右侧肾脏。温盐水复温,分层缝合 关腹,将大鼠置于加热垫上复温,苏醒后喂5%葡萄糖生理盐水,恢 复行走后放入鼠笼,正常喂养,定时观察,防止术后尿潴留等,术后 存活5d 以上表示模型成功。 |
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