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玛卡巴卡蹦

新虫 (初入文坛)

[求助] 条带跑的像mark 已有1人参与

我用几个品种的cDNA扩同一个基因,但其中有一个品种的条带跑的像mark一样,其他的品种都很好,条带单一还很亮,想问下大佬们这是为什么

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atikou

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

通常来说,退火温度是由引物的GC%含量决定的,但是反应体系的条件改变也会影响引物的退火温度(如Mg,Na等离子浓度)。一般情况下,退火温度过低只会导致反应体系中引物与DNA模板的非特异性结合,致使反应结果中出现大量非特异性结合条带。所以你可以试着增加退火温度。
--------------来自深圳市易基因的回复
2楼2022-03-25 21:16:45
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玛卡巴卡蹦

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by atikou at 2022-03-25 21:16:45
通常来说,退火温度是由引物的GC%含量决定的,但是反应体系的条件改变也会影响引物的退火温度(如Mg,Na等离子浓度)。一般情况下,退火温度过低只会导致反应体系中引物与DNA模板的非特异性结合,致使反应结果中出现 ...

好的,谢谢,我试试

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3楼2022-04-09 23:43:27
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