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空燚

新虫 (小有名气)

[求助] 多肽ESI MS多电荷情况 已有1人参与

多肽在使用ESI MS时通常会带多个电荷,那么可以同时带不同的ions吗?
即有没有可能[M+H+Na]2+,[M+2H+Na]3+,[M-H+Cl]2-的情况,还是说只可能存在[M+2H]2+,[M+2Na]2+,[M-2H]2-,[M+2Cl]2-的情况。
在使用xcalibur软件预测可能的分子量时在add ions那栏就会有one,low,high和100%的选项。

@wyy080214 @学术巨星 @klicking 发自小木虫Android客户端
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紫筱枫影

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
空燚: 金币+30, ★★★很有帮助 2022-01-06 17:26:56
有可能[M+H+Na]2+,[M+2H+Na]3+的情况,也确实遇到过。你需要注意的是,有加钠峰,必有加氢峰。
[M-H+Cl]2-没有遇到过。
[M+2H]2+   很常见,
[M+2Na]2+ 很少见,
[M-2H]2-     多肽类极少用负离子模式解卷积,完全没必要用负离子模式。
[M+2Cl]2-    加氯的情况,很少见。

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4楼2022-01-05 13:36:29
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你好小玮

银虫 (正式写手)

多肽高手


引用回帖:
6楼: Originally posted by 空燚 at 2022-01-05 16:49:21
你好,谢谢回答。我使用了MALDI TOF,LC QQQ MS以及LC ESI MS。你的意思是加合离子是我们的样品,流动相或仪器问题带入的吗。因为我是做的链霉菌产物,那么细胞内的初级或次级代谢产物是否会导致加合离子的特殊性。 ...

1、样品若是无离子干扰、就不会出现,例如:我们做反应的时候确认反应液质谱的时候,由于反应液中含有大量阳离子还是会出现,加阳离子分子离子峰;
2、同样也会出现:液质连用的时候、一般采用的是易挥发性缓冲盐流动相、若是真的采用了钠盐/钾盐等,还是会出现加阳离子分子离子峰,这就和你的样品无关;
3、我是做化学合成这块的、发酵类的、还不是很清楚呢、但是你说的这种情况,我们一般都是采用液质(不含无机盐流动相)、这样就可以排除加阳离子分子离子峰的干扰了;
7楼2022-01-06 08:32:00
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紫筱枫影

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 空燚 at 2022-01-05 16:43:36
感谢回答。需要追问一下多肽不需要根据酸碱性来决定打什么模式吗,因为我的多肽都是酸性的,所以在后面打ESI的时候都是选择的负离子模式。另外你提到的有钠峰必有氢峰,一个电荷的时候能够理解,那么多电荷的时候无 ...

多肽不需要,酸性氨基酸较多时,同样可以电离,直接正离子模式完事。多电荷时,有发现加钠的峰,那么就去找[M+nH]n+。如果没有加合全是氢的峰,可能认为的加钠峰是误判,我遇到过。

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8楼2022-01-06 08:35:29
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你好小玮

银虫 (正式写手)

多肽高手


引用回帖:
2楼: Originally posted by 空燚 at 2022-01-04 16:52:48
没有人吗

这个都是有可能的、我是从实际质谱打出来的结果(质谱确定带有离子的情况下、若是你不确定的话、可以采用液质的、这样就可以确定原样是否正确的、前提是液质的流动相最好采用无缓冲盐的流动相)

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2022-01-05 09:12:18
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空燚

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 紫筱枫影 at 2022-01-05 13:36:29
有可能2+,3+的情况,也确实遇到过。你需要注意的是,有加钠峰,必有加氢峰。
2-没有遇到过。
2+   很常见,
2+ 很少见,
2-     多肽类极少用负离子模式解卷积,完全没必要用负离子模式。
2-    加氯的情况, ...

感谢回答。需要追问一下多肽不需要根据酸碱性来决定打什么模式吗,因为我的多肽都是酸性的,所以在后面打ESI的时候都是选择的负离子模式。另外你提到的有钠峰必有氢峰,一个电荷的时候能够理解,那么多电荷的时候无论是加合几个钠都会存在[M+nH]n+是吗

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5楼2022-01-05 16:43:36
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普通回帖

空燚

新虫 (小有名气)

2楼2022-01-04 16:52:48
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空燚

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 你好小玮 at 2022-01-05 09:12:18
这个都是有可能的、我是从实际质谱打出来的结果(质谱确定带有离子的情况下、若是你不确定的话、可以采用液质的、这样就可以确定原样是否正确的、前提是液质的流动相最好采用无缓冲盐的流动相)...

你好,谢谢回答。我使用了MALDI TOF,LC QQQ MS以及LC ESI MS。你的意思是加合离子是我们的样品,流动相或仪器问题带入的吗。因为我是做的链霉菌产物,那么细胞内的初级或次级代谢产物是否会导致加合离子的特殊性。

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6楼2022-01-05 16:49:21
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空燚

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 紫筱枫影 at 2022-01-06 08:35:29
多肽不需要,酸性氨基酸较多时,同样可以电离,直接正离子模式完事。多电荷时,有发现加钠的峰,那么就去找n+。如果没有加合全是氢的峰,可能认为的加钠峰是误判,我遇到过。...

那就是无论怎样都会存在[M+nH]n+的峰对吧。那么像图中加合溶剂分子的时候,多电荷情况下是加合1个溶剂分子,还是[M+n溶剂分子+nH]n+呢
多肽ESI MS多电荷情况



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9楼2022-01-06 13:01:09
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空燚

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 你好小玮 at 2022-01-06 08:32:00
1、样品若是无离子干扰、就不会出现,例如:我们做反应的时候确认反应液质谱的时候,由于反应液中含有大量阳离子还是会出现,加阳离子分子离子峰;
2、同样也会出现:液质连用的时候、一般采用的是易挥发性缓冲盐 ...

谢谢您的回答

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10楼2022-01-06 13:02:21
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