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反对派

银虫 (正式写手)

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[求助] PCR热盖的问题温度设定多少度已有3人参与

用PCR管在PCR仪里面37℃酶切，热盖温度是设定37℃，还是其它温度？理由是什么？

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1楼 2021-12-16 21:49:07

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atikou

铜虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

热盖的位置在PCR仪器的上部，盖好PCR仪以后紧贴PCR管管盖的即为热盖。现在的PCR仪一般均配备热盖，PCR仪的热盖温度有默认设置。一般应该在100℃以上，但如果这个设置被改了，或者运行程序的时候根本没有选择使用热盖，就会造成样品损失。热盖温度一般设为105℃，使样品管顶部的温度达到105℃左右，蒸发的反应液就不会产生凝集在管盖上而改变反应体积，这样用户就无需再向反应管内加石蜡油，直接减少后继反应的麻烦。如果是旋转加压的热盖就要特别小心，因为压力到达时没有明显的提示，用户需要根据经验将热盖旋到合适位置，不太容易掌握。如果过松，热盖没有充分接触反应管而影响结果；如果过紧，则会导致反应管变形，甚至可能造成热盖的机械故障。最新的ESP技术是指热盖加热时不接触样品管，避免加热样品管导致非特异产物，等加热到设定温度后热盖下降，将样品管压入加热模块，下降时间和压力都由电子控制。热盖的位置在PCR仪器的上部，盖好PCR仪以后紧贴PCR管管盖的即为热盖。一般实验过程中比反应温度高5-10℃即可。
----------来自深圳市易基因的回复