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忘记将来

木虫 (正式写手)

[交流] 请教关于原核表达的问题

请教各位高手,我在用大肠做原核表达时,第一次诱导产物有活性,但是再用相同的方法诱导时,产物基本无活性,而且SDS电泳,条带有点儿偏大,这是怎么回事?是发生突变了么?
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yoyoyehan

进来学习一下
2楼2009-08-26 17:25:04
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
肯能变异了吧。诱导物是什么?
如果没有人帮助你,那么你就去帮助别人。
3楼2009-08-26 17:37:37
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rural2084

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能有突变了,换用你第一次保留的菌试试。
4楼2009-08-26 18:22:09
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忘记将来

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by amisking at 2009-8-26 17:37:
肯能变异了吧。诱导物是什么?

诱导物是IPTG
5楼2009-08-26 21:44:23
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忘记将来

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by rural2084 at 2009-8-26 18:22:
可能有突变了,换用你第一次保留的菌试试。

做过了,结果还是偏大,当时测序结果完全正确。
6楼2009-08-26 21:45:18
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是保存 工程菌的甘油浓度不正确?

pet系列的载体要求保存的甘油浓度是8-10%,太高了质粒容易发生变异的。

祝好运。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
7楼2009-08-26 22:13:01
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-26 22:15
是不是保存 工程菌的甘油浓度不正确?

pet系列的载体要求保存的甘油浓度是8-10%,太高了质粒容易发生变异的。

祝好运。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
8楼2009-08-26 22:13:34
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

是不是保存 工程菌的甘油浓度不正确?

pet系列的载体要求保存的甘油浓度是8-10%,太高了质粒容易发生变异的。

祝好运。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
9楼2009-08-26 22:14:06
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

不好意思,机子刚才卡了,一下发了这么多次。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
10楼2009-08-26 22:14:44
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