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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何选择超滤管
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)

[交流] 如何选择超滤管

大家好！
    我的目的蛋白是一个复合体，其中可能有１－３个组分，大小分别为：Ａ，26KD,Ｂ：40KD，C：60KD.或者，这三个组份是两两结合在一起的，也就是说，这个复合体可能是ABC三者结合在一起，也有可能是AB一起，BC一起，或者AC一起的。请问如果是这种情况，超滤管我该如何选择？
    另外，如果有的话，我想要一份密理博超滤管的说明书。
    非常感谢！
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1楼 2009-08-25 11:32:03
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by snoopyzxx at 2009-8-26 20:58:


我今天用了一下，用的是vivaspin 500ul的超滤管。
因为样品是什么不清楚，里面的成分，分子量，都不清楚，所以我的方法就是先摸索条件。
根据说明书，我选择了比较保守的4000rpm，每离心2min停下来看一下。 ...

请问，离心的时候要不断停下来看吗？如果完全离干了会怎么样呢？把离出的液体按照想要的体积再加进去把蛋白溶解出来不可以吗？
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13楼2009-08-26 22:30:26
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-25 12:40
你看你要截留那部分物质，就选择比最小分子量小的，如果你要截留26KD的，你要的超滤管就要比26小。但两者也要有一定的差距，比如，选择20-25KD之间的就不合适，因为26的也可能会出去（这是由制造工艺决定的）。所以选择20KD以下的超滤管比较合适。
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
2楼2009-08-25 12:20:52
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)
[quote]Originally posted by snoopyzxx at 2009-8-25 12:20:
你看你要截留那部分物质，就选择比最小分子量小的，如果你要截留26KD的，你要的超滤管就要比26小。但两者也要有一定的差距，比如，选择20-25KD之间的就不合适，因为26的也可能会出去（这是由制造工艺决定的）。所 ... [/quote]

那就是说我可以选择10KD的了？这种小分子量的会不会对大蛋白的超滤有什么影响呢？因为有可能这个复合体是40KD＋60KD的。
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3楼2009-08-25 13:09:01
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
xiaoli8609(金币+2,VIP+0):谢谢！ 8-26 00:02
xiaoli8609(金币+1,VIP+0): 8-26 10:38
不会有影响。
这个就跟筛子一样啊。
除非你想除掉一些小于26kd，大于10kd的杂质。否则，10kd是可以的。
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
4楼2009-08-25 13:27:02
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