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陈陈小颖子

银虫 (小有名气)

[交流] 求助:关于紫外测定最佳波长的确定

请教各位:本人最近在建立一个植物总黄酮含量测定的方法,以芦丁为标准品(用NaNO2-Al(N03)3-NaOH显色法),但是在200nm-600nm进行紫外扫描时发现,我的样品最大吸收峰和芦丁标准品最大吸收峰相距很远.....所以现在不知道应该怎样选择最终测定波长,请知道的前辈指点指点,不胜感激!(是不是这种情况选择芦丁作为标准品都是不合适的??)紧急!!!
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笨笨猪0608

铁杆木虫 (职业作家)


xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢参与 8-26 13:39
芦丁用这个方法测含量不稳定
我论文也用的这个方法,被质疑了的
专家建议用HPLC法
选芦丁为标准品,是可以的
2楼2009-08-25 10:35:30
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pal2004

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
ynmyx(金币+2,VIP+0):感谢参与交流! 8-25 21:13
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢参与 8-26 13:39
黄酮有两个吸收峰,分别是苯甲酰基(220-280nm)和桂皮酰基(300-400nm)的吸收。
确定黄酮的紫外检测波长,不一定要选最大吸收(一般220-280nm)。遇到最大吸收位置有干扰等情况,也可以用300多nm的峰,当然,前提是对照(芦丁)和样品的300多nm峰位置一致。
3楼2009-08-25 11:48:05
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licuibing

银虫 (小有名气)

500nm左右
4楼2009-08-25 12:18:17
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xiaoyuyiyi

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用此显色法是有条件的,你的药品是不是有适合这个显色法的结构?最好先确定一下
5楼2009-08-25 12:58:33
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辰龙在天

铁杆木虫 (小有名气)

紫外 本来就是不太稳定的,用HPLC吧
不要用战术上的勤奋来掩盖战略上的懒惰。
6楼2009-08-26 12:34:09
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bierhoff200320


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
样品存在其他成分干扰,紫外测中药成分难度比较大
7楼2009-08-26 14:17:43
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cmj200412

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用NaNO2-Al(N03)3-NaOH显色法测芦丁要求操作迅速,否则会造成结果偏低,UV测定黄酮类成分一般用芦丁,但是这个方法比较粗放,如果有确定的成分,可以用HPLC
8楼2009-09-26 08:49:15
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