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| 【悬赏金币】回答本帖问题,作者周东浩129将赠送您 50 个金币 | ||
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阳性转化子验证
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实验小白,第一次做化学转化,感受态用的是 DH5a,因为需要在原质粒上更换启动子,所以利用反向pcr对质粒进行线性化,利用同源重组把需要的启动子更换上去,随后提取质粒,m13引物验证没有问题。随后在提取质粒的基础上,把目的基因利用同源重组的方式整合上去,操作和上一步几乎相同,可是在利用m13引物验证的时候p不出来,后来发现不是操作和感受态的问题,在更换了新引物进行验证后,发现质粒确实已经转化进入细胞了,请问大佬们为什么会这样,怎么避免这种问题的发生,谢谢。 发自小木虫Android客户端 |
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