24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1889  |  回复: 15
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

蝶谷医仙

新虫 (小有名气)

[交流] 新手弱问:做PCR的目的是什么?

刚进实验室老板就交待了课题方向,因为对实验从来没有概念(以前是搞临床的),只大概听明白了老板的意思,观察某种生长因子对体外培养的血管内皮细胞产生的效应,具体说呢,血管内皮细胞的DNA里有某一段基因序列的终产物是某种蛋白,要观察加了这种生长因子后对产生这种蛋白是什么影响。就糊涂了,做PCR好像只是扩增一段目的基因啊,我扩增了这段基因后对检验产生的蛋白有什么作用呢?也就是说,我用培养的细胞做了PCR后,该继续干什么,怎样进行下去我的课题?
完全是晕的,请各位高手赐教一二,帮忙看看我的课题到底是要干什么?具体怎么做,万分感谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xutao

金虫 (著名写手)

第三军团总参谋


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
从你的叙述来看,你克隆的基因估计是这种生长因子的基因,把他克隆到表达载体上,做转染看对蛋白表达是否有影响!也有可能是2楼说的
第三军团
6楼2009-08-25 16:18:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我不懂这个方向。我觉得是不是做定量PCR或半定量PCR检测这种生长因子对你的目的基因表达水平的影响呢?
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
2楼2009-08-25 11:30:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-25 12:40
现在要得到某种蛋白质,一般就是直接合成(这种方法难度太高且成本也高)或通过克隆基因进行表达。所以你PCR基因的目的显而易见,就是为了表达得到蛋白质。
你把目的基因扩增出来了,就可以继续转化表达载体,进而通过原核或真核表达系统表达出该种蛋白质,那么你就可以对这种蛋白质的性质或这种蛋白质和其他蛋白质的相互作用进行研究了。
我看你的课题,克隆、表达、纯化等等都是要做的,包括后续的功能鉴定就更复杂了。
不知道我说的对不对,期待高手。
VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
3楼2009-08-25 12:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子

把基因克隆到表达载体上表达的得到更多更纯的蛋白~~
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
4楼2009-08-25 14:50:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 药学305求调剂 +7 玛卡巴卡boom 2026-04-11 7/350 2026-04-15 13:21 by 西北望—风沙
[考研] 085500求调剂材料 +11 易11122 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:59 by lhj2009
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +10 天下ww 2026-04-09 11/550 2026-04-13 23:25 by pies112
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 2本,初试303,0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 295分求调剂 +13 ?要上岸? 2026-04-10 13/650 2026-04-12 15:37 by laoshidan
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +5 弱水听文 2026-04-09 5/250 2026-04-12 13:16 by shengxi123
[考研] 电气工程专硕320求调剂 +5 小麻子111 2026-04-10 5/250 2026-04-12 10:47 by zhouyuwinner
[考研] 一志愿西北工业大学289 085602 +33 yang婷 2026-04-10 34/1700 2026-04-12 08:11 by Art1977
[考研] 化工调剂求导师收留!一志愿失利,踏实肯干,有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 277 数一104,学硕,求调剂 +21 瓶子PZ 2026-04-09 23/1150 2026-04-11 23:12 by labixiaoqiao
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 284求调剂 +12 archer.. 2026-04-10 13/650 2026-04-11 08:44 by zhq0425
[考研] 一志愿北理工298英一数二已上岸,感谢各位老师 +14 Reframe 2026-04-10 16/800 2026-04-10 23:07 by caotw2020
[考研] 初试261 +3 Asht少 2026-04-10 6/300 2026-04-10 16:38 by Asht少
[考研] 青岛科技大学材料学院,环境学院调剂补录4月10日以前都可以 +3 1青科大。 2026-04-09 5/250 2026-04-10 09:58 by 翩翩一书生
[考研] 0703化学求调剂 +21 不知名的小卅 2026-04-08 21/1050 2026-04-09 18:55 by l_paradox
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
信息提示
请填处理意见