24小时热门版块排行榜    

查看: 2011  |  回复: 15
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

蝶谷医仙

新虫 (小有名气)

[交流] 新手弱问:做PCR的目的是什么?

刚进实验室老板就交待了课题方向,因为对实验从来没有概念(以前是搞临床的),只大概听明白了老板的意思,观察某种生长因子对体外培养的血管内皮细胞产生的效应,具体说呢,血管内皮细胞的DNA里有某一段基因序列的终产物是某种蛋白,要观察加了这种生长因子后对产生这种蛋白是什么影响。就糊涂了,做PCR好像只是扩增一段目的基因啊,我扩增了这段基因后对检验产生的蛋白有什么作用呢?也就是说,我用培养的细胞做了PCR后,该继续干什么,怎样进行下去我的课题?
完全是晕的,请各位高手赐教一二,帮忙看看我的课题到底是要干什么?具体怎么做,万分感谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caicaiyy

铜虫 (小有名气)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 10-7 16:35
“就糊涂了,做PCR好像只是扩增一段目的基因啊,我扩增了这段基因后对检验产生的蛋白有什么作用呢?”
基因控制蛋白质的合成啊。基因表达受影响了,那当然影响蛋白质的合成了。
你应该做RT-PCR,也就是常说的反转入PCR。然后电泳看条带情况。
16楼2009-10-07 15:55:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我不懂这个方向。我觉得是不是做定量PCR或半定量PCR检测这种生长因子对你的目的基因表达水平的影响呢?
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
2楼2009-08-25 11:30:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-25 12:40
现在要得到某种蛋白质,一般就是直接合成(这种方法难度太高且成本也高)或通过克隆基因进行表达。所以你PCR基因的目的显而易见,就是为了表达得到蛋白质。
你把目的基因扩增出来了,就可以继续转化表达载体,进而通过原核或真核表达系统表达出该种蛋白质,那么你就可以对这种蛋白质的性质或这种蛋白质和其他蛋白质的相互作用进行研究了。
我看你的课题,克隆、表达、纯化等等都是要做的,包括后续的功能鉴定就更复杂了。
不知道我说的对不对,期待高手。
VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
3楼2009-08-25 12:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子

把基因克隆到表达载体上表达的得到更多更纯的蛋白~~
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
4楼2009-08-25 14:50:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +3 cratir 2026-08-14 4/200 2026-08-14 11:47 by 医学老男孩
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +5 启萌科技 2026-08-12 13/650 2026-08-14 10:53 by lnjx2024
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见