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happyaliii金虫 (正式写手)
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[交流]
如何将多肽溶解在DMSO中？
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二甲基亚砜（DMSO）是一种含硫有机化合物，分子式为C2H6OS，常温下为无色无臭的透明液体。DMSO作为冷冻保护剂经常应用于细胞库。在细胞冷冻过程中，DMSO可防止胞内/胞外晶体的形成，其工作浓度为10%。DMSO通常可与盐或血清白蛋白结合。 疏水性多肽可以很容易地溶解在DMSO中。但DMSO可增加细胞的通透性，若多肽溶解于DMSO中则会对细胞产生毒性作用。高浓度的DMSO绝不可应用于细胞培养中。浓度为5%的DMSO即可让细胞膜溶解。大多数细胞株可以容忍0.5% DMSO，少许可以容忍1%的浓度，而不表现出严重的细胞毒性。然而原代细胞培养对其更敏感。所以如果是用原代细胞做剂量/反应曲线(可行性)，其浓度应低于0.1%。 对于某些疏水性非常高的多肽，可先尝试将其溶解在少量的DMSO(30-50ul,100%)中，然后慢慢 (一滴一滴地)将其添加到不断搅拌的水溶液如PBS或其他想要的缓冲液中，直至理想浓度。如果滴加过程中，肽溶液开始变浑浊，说明已经达到了溶解极限。另外，超声波有助于多肽溶解。 经验: 对几乎所有的细胞来说，浓度为0.1%DMSO是安全的。 广泛被用于细胞培养的DMSO终浓度为0.5%，不会引起细胞毒性。 虽然对部分细胞来说，1%DMSO也不会产生细胞毒性，但我们推荐0.5%。 也有5%DMSO成功地应用于某些细胞的案例。 始终保持终浓度在0.5%，但储存时可200倍高浓度溶于100%的DMSO中。 |
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