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非洲猪瘟的检测方法分析
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在我国畜牧养殖业的发展工程中，猪养殖业在其中占据着重要的地位。随着当下人们经济水平逐渐提高，对猪养殖业也提出了更高的要求，猪养殖工作逐渐受到了人们更高的重视，本文所研究的就是针对非洲猪瘟的检测工作。 随着当前人们经济水平逐渐提高，对食品的需求也逐渐多样化，而肉类产品则是人们日常生生活中所必需的，其中猪肉更是在食品市场中占据着重要的地位。而猪养殖业也是基层地区脱贫致富的重要事业。在实际猪养殖工作中，非洲猪瘟作为一种高致死性传染性疾病，一直以来深受养殖工作者和相关部门的重视，并针对这一疾病开展了相关的检测工作。 非洲猪瘟来源和症状 对野猪和家猪而言，非洲猪瘟是一种致死性和传染性的极高的疾病，高达100%的死亡率，主要病因是感染了非洲猪瘟病毒（ASFV）。 结合相关临床研究可知，该病主要分为四种类型。其中急性型所表现的潜伏期较短，一般在5d以内发病，临床症状表现为表皮发黑、高热等，患病猪通常在1周内就会死亡。该病的主要特征就是患病猪会出现发热、出血性病变等，部分毒株所引起的病症具有较高的死亡率和发病率。 针对这一疾病，目前尚且没有有效的疫苗，在当前对临床症状的研究发展非洲猪瘟与经典猪瘟十分相似，想要有效防控和根除该病最为关键的就是简便、灵敏的诊断技术。 非洲猪瘟的慢性病例的某些症状与艾滋病相似，该病也因此被相关研究者称为猪的获得性免疫缺乏综合征。因预防该病的疫苗当前还没有研制出来。 在诊断和鉴别方式上，针对非洲猪瘟或与其相似临床症状的疾病尚且没有有效的手段，并且缺乏对于活病毒的诊断技术手段。随着非洲猪瘟逐步蔓延，对病毒诊断鉴别技术的完善工作也变得越发急切，而在实验室工作中，则需要进一步完善检测方法以避免漏洞的出现。 非洲猪瘟的检测 针对非洲猪瘟，目前还没有找到治愈和防控的疫苗，因此我国针对ASFV建立了高效完善的检测实验室，随着检测实验室的建立，为非洲猪瘟的防控和治疗工作打下了坚实的基础。就目前非洲猪瘟研究现状来看，针对非洲猪瘟的病原学诊断技术主要包括抗原检测、活病毒检测、核酸检测等。 在当前的ASFV检测技术中，主要分为两大类：针对病毒DNA的核酸检测技术；针对病毒抗原、抗体反应的免疫学技术等。世界卫生组织也为该病推荐了ASFV检测方法，通过研究又总结了实时荧光定量PCR检测、PCR检测和ELISA检测等。 借助免疫学知识来检测抗体，借助检测工作我们详细地掌握了ASFV的感染过程、发生阶段，这为后续的治疗工作提供了依据，但这种检测方式存在一定弊端，就是抗体必须要感染病毒达到一定程度才会出现，这在一定程度上会延误治疗，因此在ELISA等其他抗体检测中存在一定局限性。 而在猪感染非洲猪瘟病毒的早期，借助于PCR、实时荧光定量PCR等分子生物学技术就可以实现对病毒核酸的检测，对于早期的检测工作，针对这种方法的研究和普及具有着重要的作用。实际上，针对非洲猪瘟的检测具有很多种实验室检测方法，但也各有优势和不足。 核酸检测，目前应用最为广泛的检测技术就是PCR检测技术，该项检测技术的灵敏度较高且特异性强，另外还具有操作简单、快捷等特点。但在扩增后，需要利用溴化乙锭来开展电泳检测，该种方法具有较低的敏感性，在当前检测技术中属于最简单的分子生物学检测技术。针对保存不当的组织血液、血液样品等，也可利用PCR技术进行检测。 采用实时荧光定量PCR方法可以在其中引入光谱技术，借助荧光信号的强弱变化定量来测量特异性扩增产物的量，对敏感性低这一问题予以有效解决，而且在环境中减轻了电泳检测中溴化乙锭所造成的污染。通过利用实时荧光定量PCR检测技术，可以同时针对大批量样品开展快速检测工作，具有着高敏感性、高特异性等特点，在当前非洲猪瘟检测工作得到了最为广泛的应用。 酶联免疫吸附试验（ELISA），该项试验是当前最为常用的免疫学诊断技术，该实验操作具有操作简单、速度快的优点，可用于猪群中ASFV感染的大规模调查，但无法对ASFV的早期感染做出诊断，具有一定的滞后性。 再为大家介绍一种可应用于现场直接快速核酸检测的方法，来自于苏州先达基因科技有限公司（gendx.cn），依托其自主开发的新一代核酸检测技术（New ERA）,配套荧光检测仪，打造的一体化核酸检测解决方案”，无需繁杂样本处理，操作简单，可应用于野外非洲猪瘟现场核酸检测。 该方案利用计算机分子设计（Molecular Design）、定向进化(Direct Evolution)、亲和力成熟(Affinity Maturation)等制药领域高端技术对PCR和生物体遗传物质自身扩增复制所必需的聚合酶、核酸内切酶、单链结合蛋白等进行了多次改造筛选，先达基因开发了新一代恒温扩增技术（ERA技术），在恒定温度条件下，5-8分钟即可将DNA/RNA扩增数亿倍，配合独特的引物与探针自环化结构，使检测时间仅需10分钟即可完成。灵敏度特异性可与常规荧光定量PCR媲美。 结语 从上述分析可知，非洲猪瘟作为一种全新的外来疫病，且具有高传染性和致死性，目前尚没有找到有效的疫苗进行防控，因此也受到了我国畜牧养殖业的高度重视，并为此成立了病毒检测实验室，上述针对非洲猪瘟的检测方法进行了简要分析，希望对相关部门工作人员有所帮助。 |
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