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haiyingzi

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于哺乳动物细胞内用cas9做knock in 时供体质粒的几个问题 已有1人参与

请问在哺乳动物细胞中用cas9做knock in的donor质粒有什么要求吗?是只要在哺乳动物细胞内可以复制的都可以吗?

另外donor是线性会不会提高重组效率?转染后质粒是否需要消除?  小弟刚了解这个领域,希望各路大神不吝赐教~

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张凡云

至尊木虫 (职业作家)

有可以在哺乳动物细胞内可以自我复制的质粒吗?貌似没有这样的复制子

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2楼2021-11-14 07:52:11
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haiyingzi

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 张凡云 at 2021-11-14 07:52:11
有可以在哺乳动物细胞内可以自我复制的质粒吗?貌似没有这样的复制子

是吗?我再查查,我不太懂,多谢!

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3楼2021-11-14 11:55:36
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
donor什么都可以,可是pcr出来的一个片段,也可以是一个质粒。转染后的质粒无需消除
楼上说得对,一般来讲哺乳动物细胞是不能复制质粒的(有一个例外,pEPI质粒)
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2021-11-16 12:49:18
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