应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞培养历程
141/1返回列表
查看: 1784  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

悬浮培养

新虫 (初入文坛)
已领完
细胞培养历程
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫，下载小木虫客户端

从事细胞培养工作13年，现将细胞培养的经历与大家一起分享：
1.?贴壁细胞培养：
???从 hyclone应用第一批商业化的基础培养基以前，很长一段时间病毒的扩增是通过动物组织来进行规模化培养，局限性可想而知。自从哺乳动物基础培养开发出来，大量的动物细胞被分离出来，对应的个性化培养基也呼之欲出，逐渐不同的贴壁细胞对不同的病毒的敏感性也被发搅，如伪狂犬病毒适应的细胞株有PK15、ST、IBRRS-2、BHK21、vero，蓝耳病毒PRRSV适应的细胞株有MA104、marc-145细胞、细小病毒适的细胞株有PK15、ST、IBRRS-2，圆环病毒PCV2适应的细胞株有PK15等等。随之对应制备疫苗的用病毒扩增也从组织转至细胞上，成本、环保、安全、人道等方面有很大的进步，而且病毒扩增效率也得到了很大的提高。当然这一时间主要处于贴壁细胞培养阶段，主要是用方瓶和转瓶模式，这种模式需要大量的人力去消化细胞、摇洗细胞、分装细胞、逐瓶接毒、逐瓶收获、混批测毒、组批灭活，虽然看起来复杂，但相对组织培养病毒是绝对的一大进步。
2.?载体悬浮培养：
???贴壁细胞在转瓶中培养受贴壁面积的限制，细胞一般培养是单层，长多一点无非是更致密的单层，顶多也就2*10^6/cm2,对应病毒增殖的所用到的细胞数量也会受到影响，以致出现病毒增殖瓶颈。
???这时候，人们会想到如何提高单位容积内的表面积，果不出意料，球状载体和片装载体诞生了。球状微载体代表厂家，进口GE的cytodex1-3,目前使用最多仍属cytodex1,国产完全替代品牌有上海启为生物球状微载体cyto1，使用效果基本与GE产品一致，价格也相对便宜，它的工作原理是，球状载体是由一个高分子材料制成，溶于水后能放大，臌胀，形成有一定密度的微球水溶液，密度与水相近，略重，能很好的悬于培养基中，细胞所带的电荷与微球正好相反，培养时能相互吸引最终达到贴附生长的效果。1克球状微载体大致4400平方厘米，相当于19个T225方瓶，培养病毒时高密度细胞有利于病毒更好的增殖，通常培养滴度能提高1-2个滴度。
另一个片状微体叫酯片载体，目前国内使用最多的是武汉塞科成的产品，能达到1克/1300平方厘米，它的优势在于悬浮培养时，不像球状微载体一样需要沉降换液，直接进行灌注培养，时刻有新的培养基补充营养，另个一个优势是在做流感类疫苗，接毒前通常要洗去细胞中残留的血清，片状载体可以抽去老培养基，直接加PBS进行洗数次即可。缺点是细胞生长状态不易观察，通常通过糖耗速度来观察细胞生长长势，而微载体可以直接放倒置显微镜下观察生长状态。片状载体对病毒滴度的提升仅0.5-1个滴度左右。
3.?纯悬浮培养：
??培养基不断更新迭代，用户对培养基中不含动物源成份的需求越来越强，逐渐出现了无血清培养，纯悬浮培养细胞逐渐被驯化出来，目前我所用到的纯悬浮细胞有：BHK21、VERO、sf9、highfive、PK15、ST、HEK293A、HEK293F、MDCK等等，最大规模悬浮培养达到3000L。
培养成本仅贴壁细胞1/10。
?
总的来说，细胞培养的升级其实是培养基更新迭代的产物，两者相互成就。

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2021-11-11 14:45:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悬浮培养

新虫 (初入文坛)
内容已删除
回复此楼
14楼2021-11-21 22:29:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
6号枫木塔2楼
2021-11-11 14:47   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
tzynew3楼
2021-11-11 14:48   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
yugege20094楼
2021-11-11 14:54   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
178391644575楼
2021-11-11 14:56   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
Silence_926楼
2021-11-11 15:01   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
秋土豆香7楼
2021-11-11 15:09   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
恒意赛teh8楼
2021-11-11 15:49   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
tjw08249楼
2021-11-11 15:51   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
领导SDI10楼
2021-11-11 15:54   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
asdgghjkl11楼
2021-11-11 16:01   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
紫歌未央12楼
2021-11-11 16:05   回复  
悬浮培养(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
王小花花13楼
2021-11-11 20:21   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 悬浮培养 的主题更新
141/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +5 Soliloquy_Q 2026-02-28 8/400 2026-02-28 23:36 by xyx2012xyx
[考研] 272求调剂 +3 材紫有化 2026-02-28 3/150 2026-02-28 22:52 by ms629
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 311求调剂 +8 南迦720 2026-02-28 8/400 2026-02-28 21:30 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料类求调剂 +6 wana_kiko 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:20 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 285求调剂 +5 满头大汗的学生 2026-02-28 5/250 2026-02-28 18:10 by 材料专硕调剂；
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[考研] 272求调剂 +3 田智友 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:31 by 王加浩to
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭