应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 有没有大佬做过FM4-64染料染色的？为何我用了很低的剂量胞内全被染上色了
61/1返回列表
查看: 1934  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者Chsir将赠送您 10 个金币

Chsir

新虫 (正式写手)

[求助] 有没有大佬做过FM4-64染料染色的？为何我用了很低的剂量胞内全被染上色了 已有1人参与

RT，我用文献推荐的剂量，甚至稀释了很多倍，染色效果依然不好，胞内全被染上色了
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-11-08 14:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Chsir

新虫 (正式写手)
我是用的甲醇溶解，不知道是否有影响
赞一下 回复此楼
2楼2021-11-08 16:24:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

用户晓晓

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Chsir: 金币+20, ★★★很有帮助 2021-11-15 18:58:38
这个染料和DIO/DID这些染料的染色都是非常迅速的，所以浓度不是最关键的问题，染色时间才是！
我看你是用甲醛固定了。固定过的细胞通透性一般增加，染料更容易进入细胞造成胞内染色，因为胞内一样很多膜结构或者脂类物质。

建议就是染色最长时间不超过2分钟！甚至你可以尝试1分钟或者更短的时间，
还有重要的一点就是第一遍洗要迅速，不能洗好几分钟，因为这时候低浓度的染料残留依然会继续持续染色。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2021-11-10 20:02:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Chsir

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2021-11-10 20:02:48
这个染料和DIO/DID这些染料的染色都是非常迅速的，所以浓度不是最关键的问题，染色时间才是！
我看你是用甲醛固定了。固定过的细胞通透性一般增加，染料更容易进入细胞造成胞内染色，因为胞内一样很多膜结构或者脂 ...

你好，不好意思才回复。我也发现了这个问题，所以换成蒸馏水溶解了。我现在又面临另一个问题，就是普通的荧光显微镜（自带不同滤片）可能无法区分藻类自带的荧光与这个染料的荧光，很多文献中的照片是如何用共聚焦显微镜拍摄的（因为共聚焦显微镜其实也是荧光显微镜）
赞一下 回复此楼
4楼2021-11-15 18:58:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

用户晓晓

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Chsir at 2021-11-15 18:58:27
你好，不好意思才回复。我也发现了这个问题，所以换成蒸馏水溶解了。我现在又面临另一个问题，就是普通的荧光显微镜（自带不同滤片）可能无法区分藻类自带的荧光与这个染料的荧光，很多文献中的照片是如何用共聚焦 ...

如果自带荧光那么选择染料时候就应该避开自带荧光波段。无论共聚焦还是普通荧光显微镜都是无法区分光是由谁发出来的。

还有就是有一种可能就是虽然是发同种颜色荧光，但自发荧光峰值波长和染料荧光波长有一定的差异（即有非重叠波段），这时候共聚焦就显得“高级”了，因为共聚焦一般同种颜色荧光也配置有不同的波长通道可以选择，这时候选择非重叠波段检测，就能避开自发荧光。
赞一下 回复此楼
5楼2021-11-19 21:53:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Chsir

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2021-11-19 21:53:09
如果自带荧光那么选择染料时候就应该避开自带荧光波段。无论共聚焦还是普通荧光显微镜都是无法区分光是由谁发出来的。

还有就是有一种可能就是虽然是发同种颜色荧光，但自发荧光峰值波长和染料荧光波长有一定的 ...

谢谢
回复此楼
6楼2021-11-20 12:13:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Chsir 的主题更新
61/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 半夜喝咖啡 +3 myrtle 2026-05-15 5/250 2026-05-18 01:03 by 小沈2018
[基金申请] 面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？ +5 1234567wang 2026-05-17 6/300 2026-05-17 21:18 by maxjing
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 xx7gd5zq4e 2026-05-15 6/300 2026-05-17 19:36 by Equinoxhua
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 v9tggjlwd0 2026-05-15 5/250 2026-05-17 18:39 by Equinoxhua
[教师之家] 上海大学实验技术岗位非升即走 +7 嘻嘻哈哈乐呵呵 2026-05-15 7/350 2026-05-17 16:58 by songwz
[考博] 26/27博士推荐 +3 1木头人13949 2026-05-13 3/150 2026-05-17 09:41 by YuY66
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 7hlccowb3h 2026-05-15 4/200 2026-05-17 07:46 by 11n4dfd8yn
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 l7k6xnh0yc 2026-05-14 6/300 2026-05-17 07:31 by 11n4dfd8yn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 l7k6xnh0yc 2026-05-14 6/300 2026-05-17 07:11 by 11n4dfd8yn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 k37jurhrau 2026-05-16 4/200 2026-05-17 01:35 by ue3ir18jc3
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 ky2p12rrjj 2026-05-15 4/200 2026-05-17 00:57 by ue3ir18jc3
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 x0mp7owy2b 2026-05-15 4/200 2026-05-17 00:25 by ue3ir18jc3
[基金申请] 请问大佬b0816评完了吗 +4 市民华南虎 2026-05-12 8/400 2026-05-16 19:54 by Equinoxhua
[有机交流] 求助2，4-二氯-5-嘧啶甲醛的合成方法 20+3 光吃不拉 2026-05-14 6/300 2026-05-16 19:46 by Equinoxhua
[有机交流] 求有机合成大神指点三硫酸乙烯酯（CAS：2793408-99-6）的合成路线 30+3 Leekmid 2026-05-13 10/500 2026-05-16 16:37 by czyzsu
[有机交流] 如何实现卤原子转化 +3 BT20230424 2026-05-15 5/250 2026-05-16 16:20 by czyzsu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k37jurhrau 2026-05-16 3/150 2026-05-16 13:57 by vcdazktkjx
[硕博家园] 申请博士 +3 呃?呃 2026-05-15 3/150 2026-05-16 11:01 by a4742549
[基金申请] 青C资助名额大幅增加！ +11 西葫芦炒鸡蛋 2026-05-13 15/750 2026-05-15 14:36 by ambravo
[考博] 26应届毕业生考博求助 +3 wo一定上岸 2026-05-13 3/150 2026-05-14 21:47 by 明海天涯
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭