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汕头大学海洋科学接受调剂
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oujunfei_1982

木虫 (小有名气)

[交流] MTT法能用来做细胞附着率吗?

各位虫友,大虾:
       本人是学化学出身做材料的,对于生物方面的问题只懂皮毛。请问下 MTT 法用来评价 细胞附着率 有没有什么要求?我最近有篇文章里用MTT评价了细胞附着(adhesion')和增值(Proliferation)率,结果审稿意见里写到“The MTT colorimetric assay could be used to compare the proliferation of the cells; however, it is not necessary to be related to the adhesion results.” 请大家不吝赐教。谢谢。
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ylcui

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
oujunfei_1982(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-23 21:47
现在有很多方法可以代替MTT法,比如可以用刃天青、Calcein-AM等荧光染料测定细胞黏附率,同时PI复染还可以鉴定活细胞与死细胞比例。

细胞增殖可以用BrdU掺入法,然后做Cell ELISA。

当然结晶紫染色法也可以测定细胞黏附率,还是很准的。

可以看看我早期的文章,现在方法比那时先进多了。

Biomimetic surface modification of poly(L-lactic acid) with chitosan and its effects on articular chondrocytes in vitro. Biomaterials. 2003, 24 (21): 3859-68.

[ Last edited by ylcui on 2009-8-23 at 21:34 ]
7楼2009-08-23 21:31:42
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普通回帖

amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主

★ ★
oujunfei_1982(金币+1):谢谢参与
oujunfei_1982(金币+1,VIP+0): 8-23 20:20
帮顶,不厚道一下!
如果没有人帮助你,那么你就去帮助别人。
2楼2009-08-23 20:02:59
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oujunfei_1982

木虫 (小有名气)

amisking,给说说啊。
3楼2009-08-23 20:04:43
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

★ ★
oujunfei_1982(金币+1):谢谢参与
oujunfei_1982(金币+1,VIP+0): 8-23 20:39
好像用结晶紫比较多
4楼2009-08-23 20:30:08
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主

★ ★
louyiceng(金币+2):谢谢 2010-03-05 10:38
from:http://baike.baidu.com/view/1537697.html
MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。

这个实验没有做过,仅供你参考了!
如果没有人帮助你,那么你就去帮助别人。
5楼2009-08-23 20:37:58
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oujunfei_1982

木虫 (小有名气)

别沉下去了啊。
6楼2009-08-23 21:02:36
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包子9599

禁言 (著名写手)


oujunfei_1982(金币+1):谢谢参与
本帖内容被屏蔽

8楼2009-08-23 21:37:43
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oujunfei_1982

木虫 (小有名气)

ylcui,非常感谢。
我看了几篇文献【Dental Materials 25 (2009) 473-480, Clin. Oral Impl. Res. 19 (2008) 1178-1187】,他们都有用 MTT 比色法检测 细胞附着率。
你认为这种方法是可行的吗?
另外 直接的 显微镜下 的 细胞计数 方法是不是比较老套了?
9楼2009-08-23 21:55:07
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ylcui

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by oujunfei_1982 at 2009-8-23 21:55:
ylcui,非常感谢。
我看了几篇文献【Dental Materials 25 (2009) 473-480, Clin. Oral Impl. Res. 19 (2008) 1178-1187】,他们都有用 MTT 比色法检测 细胞附着率。
你认为这种方法是可行的吗?
另外 直接的 显 ...

如果要用传统方法,就选结晶紫法,很容易操作,成本也很低。
MTT法不太适合做细胞附着率测定,不太准确,要等几个小时的。而刃天青和钙黄绿素的方法都只需要10-20min,更准确。结晶紫法不用等,最精确。

显微镜直接计数法根本不准确,现在都用细胞计数仪了。

[ Last edited by ylcui on 2009-8-23 at 22:19 ]
10楼2009-08-23 22:17:23
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